免费无码又爽又刺激激情视频-女人的逼操狗的鸡巴免费视频-原创国产中文精品客户篇-樱桃红在线看免费观看视频

肺癌和慢性阻塞性肺疾?。–OPD）是全球主要的健康挑戰(zhàn)，而兩者在患者中的共存帶來(lái)了獨(dú)特的臨床復(fù)雜性。同時(shí)患有肺腺癌（LUAD）和COPD的患者對(duì)傳統(tǒng)化療和靶向治療的反應(yīng)降低，但對(duì)免疫治療表現(xiàn)出更高的敏感性。

248例表型發(fā)現(xiàn)隊(duì)列；6例（3例患有COPD，3例未患有COPD）未經(jīng)治療的LUAD患者的腫瘤樣本、鄰近正常組織和外周血進(jìn)行單細(xì)胞轉(zhuǎn)錄組測(cè)序（scRNA-seq）；34例額外的未經(jīng)治療的LUAD患者中進(jìn)行了多重?zé)晒饷庖呓M化（mfIHC）；65例接受免疫治療的LUAD患者獨(dú)立隊(duì)列；

scRNA-seq、伯優(yōu)^®單細(xì)胞測(cè)序組織保存液

（技術(shù)服務(wù)及科技產(chǎn)品由伯豪生物提供）

1. 有COPD和無(wú)COPD的LUAD患者免疫治療結(jié)果比較

研究納入248名LUAD患者，其中140名患有COPD，108名未患COPD。兩組患者在性別、年齡、吸煙史、PD-L1表達(dá)及腫瘤分期等方面無(wú)顯著差異，且大多數(shù)患者接受了免疫治療作為一線治療。結(jié)果顯示，盡管兩組在標(biāo)準(zhǔn)免疫治療療效終點(diǎn)（如ORR、DCR和PFS）上無(wú)顯著差異，但COPD組患者在血清腫瘤標(biāo)志物（如CEA和NSE）的降低上更為顯著。在4期患者中發(fā)現(xiàn)，COPD組的DCR更高，血清腫瘤標(biāo)志物降低更顯著。表明COPD可能與LUAD患者更有利的免疫治療反應(yīng)相關(guān)。

2. LUAD患者腫瘤細(xì)胞和腫瘤免疫微環(huán)境單細(xì)胞圖譜

為闡明表型發(fā)現(xiàn)隊(duì)列中發(fā)現(xiàn)的潛在機(jī)制，對(duì)來(lái)自3名有COPD的LUAD患者和3名無(wú)COPD的LUAD患者的腫瘤樣本、鄰近正常組織樣本以及外周血單個(gè)核細(xì)胞（PBMCs）進(jìn)行了單細(xì)胞RNA測(cè)序（scRNA-seq）分析（圖1A）。基于marker基因?qū)⒓?xì)胞類型識(shí)別出包括上皮細(xì)胞、髓系細(xì)胞、T/NK細(xì)胞、B細(xì)胞、增殖細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞、成纖維細(xì)胞、肥大細(xì)胞和血小板九種細(xì)胞類型，并且在樣本和樣本類型中一致存在（圖1B-D）。在腫瘤組織中，有COPD的LUAD患者的腫瘤樣本（tC）有更低的腫瘤細(xì)胞比例和更高的免疫細(xì)胞比例（圖1E）。在正常肺組織中，有COPD的LUAD患者的組織（nC）顯示出更高的髓系細(xì)胞比例和更低的T/NK細(xì)胞比例，與COPD肺組織預(yù)期的炎癥浸潤(rùn)表型一致。然而，tC顯示出比無(wú)COPD的LUAD患者（tNC）更高的T/NK細(xì)胞比例和更低的髓系細(xì)胞比例。表明有COPD的LUAD患者的腫瘤表現(xiàn)出免疫學(xué)上“熱”腫瘤的特征，即細(xì)胞毒性免疫細(xì)胞的浸潤(rùn)增加。在腫瘤和正常組織中，COPD組的B細(xì)胞比例均有所增加。兩組患者的PBMCs分析顯示，與無(wú)COPD的LUAD患者（pNC）相比，有COPD的LUAD患者的PBMCs（pC）顯示出略低的髓系細(xì)胞比例，及T/NK細(xì)胞和B細(xì)胞略高的比例。

3. 上皮細(xì)胞的異質(zhì)性和轉(zhuǎn)錄組特征

為深入研究有或無(wú)COPD的LUAD患者的上皮細(xì)胞的異質(zhì)性，對(duì)上皮細(xì)胞進(jìn)行了無(wú)監(jiān)督聚類，得到肺泡I型（AT1）細(xì)胞、肺泡II型（AT2）細(xì)胞、基底細(xì)胞、纖毛細(xì)胞、Clara細(xì)胞等，以及五個(gè)全部來(lái)源于腫瘤組織無(wú)法被歸類為正常細(xì)胞共12個(gè)細(xì)胞群（圖2A-C）。通過(guò)inferCNV分析發(fā)現(xiàn)，這五個(gè)群拷貝數(shù)變異（CNV）水平顯著升高，認(rèn)定為惡性細(xì)胞（圖2D）。通過(guò)擬時(shí)序估的他們的分化狀態(tài)，與正常上皮細(xì)胞相比，五個(gè)腫瘤來(lái)源的上皮細(xì)胞簇在軌跡上處于不同的階段（圖2E）。并且發(fā)現(xiàn)，有COPD的LUAD患者惡性細(xì)胞的inferCNV水平更低，表明其惡性程度相對(duì)較低，在發(fā)育軌跡上也更接近正常細(xì)胞，且其轉(zhuǎn)錄組特征與無(wú)COPD患者存在顯著差異（圖2D-F）。人類白細(xì)胞抗原（HLA）在腫瘤抗原呈遞和免疫反應(yīng)激活中的關(guān)鍵作用，結(jié)果顯示，有COPD的LUAD患者惡性細(xì)胞中HLA-I激活占主導(dǎo)，而無(wú)COPD患者中HLA-II激活占主導(dǎo)（圖2G-J）。通過(guò)獨(dú)立免疫治療反應(yīng)隊(duì)列分析發(fā)現(xiàn)，HLA-I高表達(dá)的腫瘤患者預(yù)后較好，而HLA-II高表達(dá)的腫瘤患者預(yù)后較差（圖2K-L）。

4. T細(xì)胞和NK細(xì)胞的分布及功能特征

對(duì)T/NK細(xì)胞進(jìn)行細(xì)分注釋得到NK_CD56+、NK_CD16+_C1和NK_CD16+_C2三種NK細(xì)胞亞群、CD4_Tn、CD4_Tem、CD4_Tex等七種CD4+ T細(xì)胞亞群、CD8_Tn、CD8_Trm、等四種CD8+ T細(xì)胞亞型，以及一個(gè)增殖的T細(xì)胞亞群（圖3A和B）。這些細(xì)胞亞群在不同患者、樣本類型以及有或無(wú)COPD的LUAD患者樣本中表現(xiàn)出不同的分布（圖3C）。與tNC相比，tC組的CD8+ T細(xì)胞和NK細(xì)胞的總體浸潤(rùn)水平更高，但CD4+ T細(xì)胞的浸潤(rùn)水平更低（圖3D）。對(duì)于CD4?T細(xì)胞亞群而言，免疫抑制性的CD4_Tex和CD4_Treg細(xì)胞在腫瘤組織中相對(duì)于正常肺組織顯著增加；與tNC相比，tC組CD4_Ctl細(xì)胞的比例更高，而CD4_S100A6?細(xì)胞的比例更低（圖3E）。對(duì)于NK細(xì)胞，細(xì)胞毒性較強(qiáng)的NK_CD16?_C1細(xì)胞在伴隨COPD的tC組和nC組富集，而細(xì)胞毒性較弱的NK_CD16?_C2亞型在非COPD患者中更為常見（圖3F和G）。此外，CD8_Tem細(xì)胞的比例tC組相對(duì)于tNC組更高，CD8_Tex細(xì)胞的比例更低。這些結(jié)果表明，在患有COPD的LUAD患者的腫瘤免疫微環(huán)境中，具有細(xì)胞毒性潛力的腫瘤浸潤(rùn)免疫細(xì)胞的豐度有所增加。

5. CD8+T細(xì)胞的不同動(dòng)力學(xué)和功能狀態(tài)

CD8+ T細(xì)胞在腫瘤進(jìn)展和免疫治療反應(yīng)中的關(guān)鍵作用，基于發(fā)育分支和進(jìn)化時(shí)間過(guò)程，將這些CD8+ T細(xì)胞進(jìn)行擬時(shí)序分析，分為六個(gè)階段，包含八個(gè)細(xì)胞亞型（圖4A-B）。分析結(jié)果顯示，CD8+ T細(xì)胞從CD8_Tn（第1階段）有效轉(zhuǎn)變?yōu)榫哂懈叨燃?xì)胞毒性的CD8_Tem（第2a、3、4、5階段）和CD8_Trm（第2b階段），最終發(fā)展為高度耗竭的CD8_Tex（第6a、6b階段）細(xì)胞（圖4C-D）。值得注意的是，盡管高度耗竭的晚期CD8+ T細(xì)胞在腫瘤組織中占主導(dǎo)地位，但來(lái)自COPD患者的CD8+ T細(xì)胞也包含一個(gè)具有高度細(xì)胞毒性的中間階段CD8+ T細(xì)胞亞群（圖4E）。這一結(jié)果通過(guò)mfIHC得到驗(yàn)證，與tNC相比，tC組的GZMK+CD8+ T細(xì)胞的數(shù)量和細(xì)胞毒性評(píng)分顯著更高（圖4F-H）。這些發(fā)現(xiàn)表明，與無(wú)COPD的患者相比，有COPD的LUAD患者的腫瘤免疫微環(huán)境（TIME）具有更強(qiáng)的腫瘤殺傷能力。特別是6b階段細(xì)胞僅存在于腫瘤組織中，并且TIGIT、LAG3、PDCD1等免疫檢查點(diǎn)相關(guān)基因的高表達(dá)為特征，可能有助于解釋有COPD和無(wú)COPD的LUAD患者之間免疫治療反應(yīng)的差異。通過(guò)對(duì)CD8_Tex的表達(dá)譜差異分析發(fā)現(xiàn)，細(xì)胞毒性標(biāo)記物GZMB和KLRD1在tC組高表達(dá)，免疫球蛋白相關(guān)基因包括IGHG4、IGKC、IGLC2等同樣在tC組高表達(dá)，這反映了更強(qiáng)的促炎和抗腫瘤能力（圖4I）;CTLA4、LAG3、TIGIT等基因在tN組的表達(dá)顯著上調(diào)（圖4J），這也意味著有COPD的LUAD患者可能對(duì)免疫治療有更好的反應(yīng)（圖4J）。值得注意的是，在tN患者腫瘤浸潤(rùn)性CD8_Tex細(xì)胞中，與免疫治療反應(yīng)密切相關(guān)趨化因子配體13（CXCL13）的表達(dá)顯著增加，并通過(guò)mfIHC進(jìn)一步驗(yàn)證（圖4K-M）。

在免疫治療反應(yīng)隊(duì)列中，CXCL13高表達(dá)的患者對(duì)免疫治療的反應(yīng)更好（圖4N）。這些發(fā)現(xiàn)表明，有COPD和無(wú)COPD的LUAD患者腫瘤浸潤(rùn)性CD8_Tex細(xì)胞之間的差異可能是導(dǎo)致免疫治療反應(yīng)差異的原因，COPD患者中CXCL13+ CD8_Tex細(xì)胞的高豐度可能發(fā)揮了關(guān)鍵作用。

6. 髓系細(xì)胞亞型的不同分布

對(duì)髓系細(xì)胞進(jìn)行亞群細(xì)分，注釋得到4個(gè)組織駐留巨噬細(xì)胞群、3個(gè)單核細(xì)胞衍生巨噬細(xì)胞群、3個(gè)單核細(xì)胞群、3個(gè)樹突狀細(xì)胞群、1個(gè)中性粒細(xì)胞群和1個(gè)增殖巨噬細(xì)胞群（圖5A-B）。來(lái)自腫瘤和正常肺組織的髓系細(xì)胞在不同亞型之間分布較為平衡，而來(lái)自PBMC的髓系細(xì)胞主要由單核細(xì)胞和樹突狀細(xì)胞組成（圖5C）。促炎、抗炎和HLA功能基因集的表達(dá)分析發(fā)現(xiàn)，TRM4表現(xiàn)出促炎基因的高表達(dá)水平，MDM1表現(xiàn)出促炎和抗炎基因特征；MDM2顯示出對(duì)趨化因子（如CXCL9、CXCL10和CXCL11）和HLA-I類分子（包括HLA-A、HLA-B和HLA-C）的特異性高表達(dá)，表明其具有獨(dú)特的促炎表型及與CD8+ T細(xì)胞存在相互作用；相反，MDM3表現(xiàn)出抗炎因子（如IL10、CD163和FOLR22）的特異性高表達(dá)（圖5D）。M1和M2極化評(píng)分也表明，MDM2代表一種促炎的M1樣巨噬細(xì)胞表型，而MDM3則對(duì)應(yīng)一種抗炎的M2樣巨噬細(xì)胞表型（圖5E）。TRMs和MDMs主要來(lái)源于腫瘤和正常肺組織，TRMs在腫瘤和正常肺組織中的整體分布相對(duì)一致，MDM在nC組中的豐度更高，表明在受COPD影響的正常肺組織中同時(shí)存在促炎和抗炎狀態(tài)，并且tC組的MDM2具有顯著更高的促炎能力（圖5F-G），這些發(fā)現(xiàn)突顯COPD在促進(jìn)或維持腫瘤組織中具有促炎功能的MDM2亞群中的作用。對(duì)DCs進(jìn)行了全面分析發(fā)現(xiàn)，tC組有較低豐度的cDCs，較高豐度的mregDCs。此外，mregDCs表達(dá)共刺激分子（如CD40、CD80和CD86），表現(xiàn)出成熟的激活表型，這些分子有助于招募各種浸潤(rùn)性T細(xì)胞亞群，還表現(xiàn)出增強(qiáng)的遷移能力和免疫調(diào)節(jié)能力（圖5H）。值得注意的是，樹突狀細(xì)胞的成熟評(píng)分與免疫調(diào)節(jié)和遷移評(píng)分呈正相關(guān)，這表明cDCs在成熟過(guò)程中會(huì)向引流淋巴結(jié)遷移，最終轉(zhuǎn)變?yōu)閙regDCs，并在腫瘤免疫微環(huán)境（TIME）中誘導(dǎo)免疫耐受（圖5I-K）。因此，mregDCs在有COPD的LUAD患者腫瘤組織中的富集可能會(huì)增強(qiáng)這些患者對(duì)免疫治療的反應(yīng)性。

7. 免疫微環(huán)境中B細(xì)胞浸潤(rùn)和活性的增強(qiáng)

對(duì)B細(xì)胞進(jìn)行亞群細(xì)分，注釋得到naïve B cells、PCs和三個(gè)memory B cells亞群共5個(gè)細(xì)胞亞群（圖6A-B）。無(wú)論是正常肺組織還是癌性肺組織，COPD患者的肺組織中B細(xì)胞/漿細(xì)胞的豐度均顯著增加，這表明COPD促進(jìn)了它們?cè)诜文[瘤免疫微環(huán)境（TIME）中的積累（圖6C）。來(lái)自tC組的記憶B細(xì)胞表現(xiàn)出更高的HLA基因表達(dá)水平（圖6D）。對(duì)PC細(xì)胞進(jìn)行差異分析及富集分析發(fā)現(xiàn)，tC組B細(xì)胞受體信號(hào)通路和抗原受體介導(dǎo)的信號(hào)通路等與免疫反應(yīng)激活相關(guān)通路激活，tNC組與蛋白質(zhì)穩(wěn)態(tài)和凋亡信號(hào)通路相關(guān)激活（圖6E-G）。并且tN組中漿細(xì)胞的免疫球蛋白亞型基因表達(dá)水平顯著更高，表明其激活程度增加（圖6H）。這些發(fā)現(xiàn)強(qiáng)調(diào)了有COPD的LUAD患者腫瘤組織中記憶B細(xì)胞更強(qiáng)的抗原呈遞能力以及漿細(xì)胞增強(qiáng)的功能活性，這可能有助于腫瘤免疫治療的反應(yīng)性。

8. 惡性細(xì)胞和免疫細(xì)胞之間配體-受體細(xì)胞間相互作用的影響

為進(jìn)一步探究惡性細(xì)胞與免疫細(xì)胞之間的相互作用，利用CellChat推斷其配體-受體相互作用（圖7A）。結(jié)果顯示，在COPD條件下（tC），相互作用的總數(shù)和強(qiáng)度顯著增加(圖7B)，特別是在tC中，MDM2亞群的外向相互作用強(qiáng)度顯著增加，表明MDM2在有COPD的LUAD患者中具有更高的功能活性；有趣的是，在tC中，CD4+ T細(xì)胞、CD8+ T細(xì)胞和NK細(xì)胞來(lái)自其他譜系（尤其是惡性細(xì)胞）的傳入信號(hào)顯著增強(qiáng)；mregDC細(xì)胞向惡性細(xì)胞和髓系細(xì)胞亞群發(fā)出的信號(hào)減弱，尤其是對(duì)癌細(xì)胞的影響更為明顯（圖7C）。進(jìn)一步分析與腫瘤內(nèi)免疫反應(yīng)相關(guān)的CD4+ T細(xì)胞、CD8+ T細(xì)胞和NK所接收到的細(xì)胞信號(hào)，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，在tC中，CD4+ T細(xì)胞以HLA-II為主，NK細(xì)胞和CD8+ T細(xì)胞則以HLA-I為主；這些發(fā)現(xiàn)表明，在tC中，免疫激活信號(hào)得到了增強(qiáng)，可能會(huì)提高免疫活性的程度（圖7D）。深入了解MDM2對(duì)這三種免疫效應(yīng)細(xì)胞類型的調(diào)控作用，結(jié)果表明，在tC中，這三種細(xì)胞類型從MDM2接收到的信號(hào)增強(qiáng)，主要涉及HLA-I、HLA-II、TNF、FN1、半乳糖凝集素以及其他促免疫信號(hào)通路（圖7E）。

研究發(fā)現(xiàn)，COPD患者的腫瘤細(xì)胞表現(xiàn)出更高的HLA-I表達(dá)和較不具侵襲性的表型。同時(shí)，這些患者的腫瘤免疫微環(huán)境（TIME）更為活躍，表現(xiàn)為自然殺傷（NK）細(xì)胞、效應(yīng)CD4+ T細(xì)胞和效應(yīng)CD8+ T細(xì)胞的浸潤(rùn)增加，以及表達(dá)免疫檢查點(diǎn)基因的CXCL13+CD8+ T細(xì)胞和成熟調(diào)節(jié)性樹突狀細(xì)胞（mregDC）數(shù)量的增加。這些特征共同促進(jìn)了COPD患者對(duì)免疫治療的更好反應(yīng)。本研究為針對(duì)COPD患者的LUAD治療策略的優(yōu)化提供了理論基礎(chǔ)，為理解其增強(qiáng)的免疫治療反應(yīng)機(jī)制提供了全面的資源，并為開發(fā)新的免疫治療增強(qiáng)方法鋪平了道路。

參考文獻(xiàn)：

Huang Y, Liang B, Chen X, et al. Enhanced immunotherapy response in lung adenocarcinoma patients with COPD: insights into tumor cells and immune microenvironment characteristics. Cell Commun Signal. 2025 Jul 4;23(1):324. doi: 10.1186/s12964-025-02332-7 . PMID: 40616101.