鏈脲佐菌素（Streptozotocin, STZ）作為一種廣譜抗生素，因其對胰島β細(xì)胞具有特異性毒性作用，已成為建立實驗性糖尿病動物模型的首選誘導(dǎo)劑。它通過GLUT2葡萄糖轉(zhuǎn)運蛋白進(jìn)入β細(xì)胞，引起DNA烷基化并消耗NAD+，最終導(dǎo)致胰島素合成與分泌功能障礙，引起糖尿病，建立糖尿病動物模型。今天我們就來學(xué)習(xí)下如何利用STZ誘導(dǎo)大鼠Ⅰ型糖尿病模型。
實驗準(zhǔn)備
1.實驗動物選擇
推薦使用6-8周齡SPF級雄性SD大鼠，實驗前在標(biāo)準(zhǔn)飼養(yǎng)環(huán)境（溫度22±2℃，濕度50±10%，12/12小時明暗周期）中適應(yīng)性飼養(yǎng)1-2周。
2.試劑配制
（1）STZ溶液：臨用前用檸檬酸-檸檬酸鈉緩沖液配制1%濃度STZ溶液干燥避光，推薦用干燥鋁箔（或錫箔）紙包裹，并在30分鐘內(nèi)完成注射。
（2）檸檬酸-檸檬酸鈉緩沖液：雙蒸水溶解檸檬酸與檸檬酸三鈉，過濾除菌。
造模操作流程
1.禁食處理
注射前大鼠禁食12小時（自由飲水），此步驟可增強(qiáng)胰島β細(xì)胞對STZ的敏感性。
2.給藥方案
STZ給藥通常采取單次大劑量的方法：按50-70 mg/kg 體重腹腔注射 STZ（注射速度緩慢，避免刺激腹腔）。
（注意：實驗前應(yīng)進(jìn)行預(yù)實驗，確定合適藥量，不要盲目按照文獻(xiàn)用藥量直接進(jìn)行實驗）
3.注射后護(hù)理
注射完STZ后要給予動物足夠的水、食物，每日換墊料，保持鼠籠干燥。注意避免強(qiáng)日光照射，并盡可能做到勤消毒。
（注意：STZ造模后，明顯血糖水平波動呈現(xiàn)3個時相，一時性高血糖(1-2 h)、短暫低血糖(6-10 h)、持續(xù)高血糖(>72 h)。必須適當(dāng)補(bǔ)給胰島素和葡萄糖）
4.成模標(biāo)準(zhǔn)（72 小時后）
禁食6小時后測空腹血糖（FBG），若FBG≥16.7 mmol/L（人類T1DM診斷標(biāo)準(zhǔn)的2倍，確保β細(xì)胞嚴(yán)重?fù)p傷），連續(xù)2-3天檢測均為同樣結(jié)果，即為成功模型。
注意事項
1. 建模用STZ純度應(yīng)不低于98%（HPLC檢測）。
2.STZ易潮解，應(yīng)干燥保存，避免受潮。粉末避免長時間室溫放置，溶解的STZ非常不穩(wěn)定，在中性pH值的半衰期為15 min，應(yīng)現(xiàn)配現(xiàn)用。注意用酸性pH值溶液溶解STZ，最好放在冰浴里。
3.注射后24-48小時可能出現(xiàn)暫時性低血糖，需密切觀察動物狀態(tài)。
模型檢驗其他指標(biāo)
1. 進(jìn)行葡萄糖耐量試驗（GTT）：確認(rèn)糖代謝異常，模型動物血糖峰值會更高，且降血糖過程緩慢，和正常動物相比曲線下面積（AUC）明顯增大。
2. 胰島素水平檢測：通過ELISA測定血清胰島素，模型動物的胰島素分泌量會明顯減少。
3. 組織學(xué)檢查：HE染色觀察胰島結(jié)構(gòu)破壞情況，組織病理學(xué)檢查顯示胰島β細(xì)胞受損，如數(shù)量減少、結(jié)構(gòu)紊亂等。
STZ糖尿病模型成功的關(guān)鍵在于精確控制給藥劑量、給藥方式和飼養(yǎng)條件，建議預(yù)實驗確定最佳劑量，并注意實驗操作對造模成功率的影響。規(guī)范的實驗操作可獲得穩(wěn)定可靠的糖尿病動物模型，為糖尿病發(fā)病機(jī)制研究和藥物研發(fā)提供重要工具。
產(chǎn)品推薦
| 產(chǎn)品應(yīng)用 | 產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品貨號 |
| 用于大小鼠糖尿病造模 | Streptozocin 鏈脲佐菌素 | C331605 |