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<p><strong>【細胞介紹】</strong></p> <p>Lewis肺癌是從C57BL小鼠的肺建立的細胞系，該小鼠帶有由原發性Lewis肺癌的移植產生的腫瘤。LLC細胞對1, 3-雙-（2-氯乙基）-1-亞硝基脲有抗性，但對甲氨蝶呤敏感。據報道，LLC細胞具有高度致瘤性，可以在C57BL小鼠成瘤，但在小鼠中轉移性較弱。LLC細胞在培養瓶中形成多層，但實際上沒有融合。LLC細胞鼠痘病毒陰性，被廣泛用作轉移模型，并有助于研究癌癥化療藥物的機制。</p> <p>以下是中喬新舟拍攝的LLC細胞拍攝的在不同放大倍數下的圖片：</p> <p><img src="https://img.medsci.cn/e76f5d2bbefdb62ed816fb6a9aa24109603dfbd4fc5017f7f0e60102b7975206.jpg" /></p> <p>4X</p> <p><img src="https://img.medsci.cn/7bb06a8bc0553be4d9740d67588b0e3e50a62d6e583b978c06ac827cba5e5b1c.jpg" /></p> <p>10X</p> <p><img src="https://img.medsci.cn/d1e4ec150757ec3fdc67772c2cc033478ca5d2d2cb88361ab199d8151b36f597.jpg" /></p> <p>20X</p> <p><strong><span style="color: #000000;">細胞名稱：</span></strong>LLC小鼠肺癌細胞</p> <p><strong><span style="color: #000000;">細胞別稱：</span></strong>LL/2 (LLC1); LL/2 (LLc1); LL/2(LLc1); LL/2; LL2; LLC1; LLC; Lewis lung carcinoma line 1; Lewis lung carcinoma; Lewis-Lung; Lewis Lung</p> <p><strong><span style="color: #000000;">產品貨號：</span></strong>ZQ0203</p> <p><strong><span style="color: #000000;">生長特性：</span></strong>半貼半懸</p> <p><strong><span style="color: #000000;">培養條件</span></strong><span style="color: #000000;"> </span><span style="color: #000000;">：</span>DMEM高糖（品牌：中喬新舟 貨號：ZQ-100）+10%胎牛血清（中喬新舟  貨號：ZQ0500）+1%雙抗（中喬新舟 貨號：CSP006）</p> <p><strong><span style="color: #000000;">完全培養基貨號</span></strong>：ZM0203</p> <p> </p> <p><strong>【細胞傳代】</strong></p> <p>該細胞為半貼壁半懸浮細胞，懸浮細胞是活細胞，可用離心管收集細胞懸液后，于（125g，3～5 分鐘）1000-1200rmp 收集細胞；部分貼壁不牢的細胞可直接吹起使之懸浮；貼壁較牢固的細胞可用 PBS 潤洗后，在培養瓶中加入 1-2 毫升 0.25% 胰蛋白酶溶液（含 EDTA）置于 37℃培養箱中消化，待細胞變圓收縮成流沙狀態脫落后可用 4-6 mL 左右完全培養基進行終止消化，輕輕吹散細胞后離心搜集細胞；將懸浮的細胞和貼壁的細胞收集到 一起混勻后按比例接種到新的培養瓶。</p> <p> </p> <p><strong>【細胞凍存】</strong></p> <p>1.細胞密度 80%以上，活細胞百分率達 95%以上時，將細胞按照以上步驟進行消化收集細胞沉淀進行凍存。</p> <p>2.細胞沉淀用適量 4°C 凍存液（貨號：CSP042）重懸， 建議一瓶 T25 細胞凍存一管（1ml/管），直接將分裝 好的細胞凍存管置于-80℃超低溫冰箱中過夜，若需液氮長期保存，需先置于-80℃至少一天后方可轉至液氮罐中。</p> <p>NOTE:若不是我司凍存液請按照凍存液說明書操作，若是自配凍存液需梯度降溫凍存(2-8℃，放置 40min:-20℃,放置 30min-60min， -80℃放置一天后轉移至液氮保存)或使用程序降溫盒降溫后，再轉移至液氮中保存。</p> <p> </p> <p><strong>【細胞復蘇】</strong></p> <p>1.液氮取出的細胞放入干冰中轉移到細胞房，提前準備好完全培養基，離心管。</p> <p>2.凍管細胞在 37°C 水浴中迅速解凍（大約 1-2 分鐘）。為了減少污染的可能性，保持凍管瓶蓋在水浴液面之 上。 一旦大部分內容物解凍，立即將凍管移出水浴，70%的乙醇消毒凍管外壁。</p> <p>3.將內容物轉移到含 3-6mL 完全培養基的離心管中，輕輕混勻，離心（125 g，3～5 分鐘）1000-1200rmp 去除培養基， 細胞沉淀用手指彈松，添加 3ml 完全培養基混勻細胞并進行計數，用適量完全培養基將細胞密度調整至 0.6-2.0X10<sup>5</sup>，轉移至培養瓶中，于培養箱中靜置培養。建議 T25 培養瓶添加 5-7ml 完全培養基。當密度達 到 80%以上時傳代。</p> <p> </p> <p><strong>【常見問題】</strong></p> <p><strong>1.</strong><strong>培養過程中細胞碎片較多怎么處理？</strong></p> <p>1）細胞內的黑色顆粒是細胞外分泌泡及細胞器折光，這個屬于細胞自身特性，無法清除也無法改變，大部分細胞都會有這種現象，只是不同細胞顆粒多少有區別，細胞培養體系不適應、營養缺乏、滲透壓異常等均可能導致細胞內顆粒增加，建議使用合適的培養條件。</p> <p>2）細胞外的黑色顆粒大部分是細胞碎片和細胞代謝產物，可通過換液去除，因此每2天正常換液即可，換液前培養基充分預熱。</p> <p><strong>2.</strong><strong>細胞具體消化時間是多久？</strong></p> <p>每個客戶用的胰酶活力及消化步驟、試劑都是不一樣的，不能完全規定消化時間，以實際消化效果和客戶經驗為準。</p> <p> </p> <p><strong>【發表過的文獻】</strong></p> <p>下面列舉了幾篇代表性的文獻，可以參考：</p> <p>1.論文題目：B4GALT1 promotes immune escape by regulating the expression of PD-L1 at multiple levels in lung adenocarcinoma.</p> <p><span style="color: #4f81bd;">期刊：</span><span style="color: #4f81bd;"> JOURNAL OF EXPERIMENTAL & CLINICAL CANCER RESEARCH</span><span style="color: #4f81bd;"> 影響因子：11.3</span></p> <p><strong>2.</strong> 論文題目：Ansofaxine suppressed NSCLC progression by increasing sensitization to combination immunotherapy.</p> <p><span style="color: #4f81bd;">期刊：</span><span style="color: #4f81bd;">INTERNATIONAL IMMUNOPHARMACOLOGY</span><span style="color: #4f81bd;"> 影響因子：4.8</span></p> <p><strong>3.</strong> 論文題目：The combination of a PTP1B inhibitor, TNFR2 blocker, and PD1 antibody suppresses the progression of nonsmall cell lung cancer tumors by enhancing immunocompetence.</p> <p><span style="color: #4f81bd;">期刊：</span><span style="color: #4f81bd;">ONCOLOGY REPORTS</span><span style="color: #4f81bd;"> 影響因子：3.8</span></p>