在分子生物學(xué)研究中，傳統(tǒng)克隆方法步驟繁瑣，成功率低，為了提高克隆效率，基于同源重組酶的無縫克隆技術(shù)應(yīng)用而生。無縫克隆技術(shù)操作簡(jiǎn)單快速，不受到酶切位點(diǎn)的限制，可一次進(jìn)行多個(gè)片段的拼接。Arcegen One Step Cloning Kit (1-7 Fragments) 通用一步法克隆試劑盒，全面優(yōu)化克隆性能，提升你的實(shí)驗(yàn)體驗(yàn)，讓科研變得輕松又高效！
精準(zhǔn)拼接，隨心所欲
滿足1-7個(gè)DNA片段的定向無縫拼接，通過在插入片段的PCR引物5’端引入與線性化載體末端對(duì)應(yīng)的同源序列，插入片段的兩端與載體末端完美匹配，精準(zhǔn)拼接，輕松實(shí)現(xiàn)高效重組。
圖1 單片段高效重組：A：重組轉(zhuǎn)化平板。載體（ 10 kb ）和插入片段（1 kb）摩爾比為1:2。C：插入片段PCR鑒定電泳圖，M：10000 DNA Marker。載體量：40 ng/6 μL反應(yīng)體系，反應(yīng)條件：50℃，15 min。
圖2 多片段輕松重組：A：重組轉(zhuǎn)化平板。載體（ 11.6 kb ）和插入片段（1 kb + 1.6 kb + 1.8 kb）摩爾比為1:2。C：插入片段PCR鑒定電泳圖，M：10000 DNA Marker，菌落PCR長(zhǎng)度2.6 kb。載體量：200 ng/20 μL反應(yīng)體系，反應(yīng)條件：50℃，20 min。
化繁為簡(jiǎn)，新手無憂
只需將PCR產(chǎn)物與線性化載體混合，加入預(yù)混好的酶液，在50℃條件下孵育5分鐘，然后進(jìn)行常規(guī)的轉(zhuǎn)化操作即可。無需復(fù)雜的酶切條件優(yōu)化，無需繁瑣的連接步驟，大大降低了實(shí)驗(yàn)難度。
圖3 一步法克隆步驟示意圖
高陽性率，出類拔萃
憑借獨(dú)特的重組增強(qiáng)因子，顯著提高了重組克隆效率，克隆陽性率可達(dá)95%以上。不需要篩選大量的克隆來尋找陽性結(jié)果，大大減少了實(shí)驗(yàn)的重復(fù)次數(shù)和工作量。
圖4 和競(jìng)品A同時(shí)做6片段克隆轉(zhuǎn)化，陽性率顯著高于競(jìng)品A：A-B：重組轉(zhuǎn)化平板。載體（ 11.6 kb ）和插入片段（0.5kb+0.7kb+1kb+1.6kb+1.8kb + 2 kb）摩爾比為1:2。C：插入片段PCR鑒定電泳圖，M：10000 DNA Marker，菌落PCR長(zhǎng)度2.6 kb。載體量：200 ng/20 μL反應(yīng)體系，反應(yīng)條件：50℃，50 min。
突破極限，挑戰(zhàn)長(zhǎng)片段克隆
輕松應(yīng)對(duì)超長(zhǎng)片段的克隆。載體片段連接長(zhǎng)度可達(dá)25 kb以上，無論是構(gòu)建復(fù)雜的基因組文庫，還是研究超長(zhǎng)基因的功能，它都能輕松搞定，讓你的實(shí)驗(yàn)不再受限于片段長(zhǎng)度。
圖5 有效克隆連接超長(zhǎng)片段：A：重組轉(zhuǎn)化平板。載體（21 kb）和插入片段（4.5 kb）摩爾比為1:2。C：插入片段PCR鑒定電泳圖，M：10000 DNA Marker。載體量：200 ng/20 μL反應(yīng)體系，反應(yīng)條件：50℃，40 min。
全面兼容，無所不能
兼容未純化PCR產(chǎn)物、直接回收的PCR產(chǎn)物、低濃度的膠回收產(chǎn)物；適用于任何載體，兼顧粘性和平末端；可用于多片段、點(diǎn)突變等的克??；可重組同源臂GC含量30%-70%的接頭片段。
客戶反饋
客戶S*數(shù)據(jù)反饋：三片段連接性能好于競(jìng)品B，菌落數(shù)多，陽性率100%
圖6 客戶反饋，有效克隆連接三片段：A-D：重組轉(zhuǎn)化平板。載體（4 kb）和插入片段（3片段大小為1-3 kb）。10μL低反應(yīng)體系，優(yōu)于競(jìng)品B。
客戶W*數(shù)據(jù)反饋：四片段連接性能好，菌落數(shù)多，陽性率85%以上
圖7 客戶反饋，有效克隆連接四片段：A：重組轉(zhuǎn)化平板。載體（3 kb）和插入片段（200 bp、200 bp、1200 bp、1400 bp）。6μL低反應(yīng)體系。
Arcegen通用一步法克隆試劑盒，為科研人員節(jié)省了大量的時(shí)間和精力，還提高了實(shí)驗(yàn)的成功率和準(zhǔn)確性，讓克隆實(shí)驗(yàn)變得輕松又高效！
產(chǎn)品推薦
| 中文名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品貨號(hào) |
| 通用一步法克隆試劑盒（1-7片段） | 1-7Fragments One Step Cloning Kit | N132081 |