在分子生物學研究中,傳統克隆方法步驟繁瑣,成功率低,為了提高克隆效率,基于同源重組酶的無縫克隆技術應用而生。無縫克隆技術操作簡單快速,不受到酶切位點的限制,可一次進行多個片段的拼接。Arcegen One Step Cloning Kit (1-7 Fragments) 通用一步法克隆試劑盒,全面優化克隆性能,提升你的實驗體驗,讓科研變得輕松又高效!
精準拼接,隨心所欲
滿足1-7個DNA片段的定向無縫拼接,通過在插入片段的PCR引物5’端引入與線性化載體末端對應的同源序列,插入片段的兩端與載體末端完美匹配,精準拼接,輕松實現高效重組。

圖1 單片段高效重組:A:重組轉化平板。載體( 10 kb )和插入片段(1 kb)摩爾比為1:2。C:插入片段PCR鑒定電泳圖,M:10000 DNA Marker。載體量:40 ng/6 μL反應體系,反應條件:50℃,15 min。

圖2 多片段輕松重組:A:重組轉化平板。載體( 11.6 kb )和插入片段(1 kb + 1.6 kb + 1.8 kb)摩爾比為1:2。C:插入片段PCR鑒定電泳圖,M:10000 DNA Marker,菌落PCR長度2.6 kb。載體量:200 ng/20 μL反應體系,反應條件:50℃,20 min。
化繁為簡,新手無憂
只需將PCR產物與線性化載體混合,加入預混好的酶液,在50℃條件下孵育5分鐘,然后進行常規的轉化操作即可。無需復雜的酶切條件優化,無需繁瑣的連接步驟,大大降低了實驗難度。

圖3 一步法克隆步驟示意圖
高陽性率,出類拔萃
憑借獨特的重組增強因子,顯著提高了重組克隆效率,克隆陽性率可達95%以上。不需要篩選大量的克隆來尋找陽性結果,大大減少了實驗的重復次數和工作量。

圖4 和競品A同時做6片段克隆轉化,陽性率顯著高于競品A:A-B:重組轉化平板。載體( 11.6 kb )和插入片段(0.5kb+0.7kb+1kb+1.6kb+1.8kb + 2 kb)摩爾比為1:2。C:插入片段PCR鑒定電泳圖,M:10000 DNA Marker,菌落PCR長度2.6 kb。載體量:200 ng/20 μL反應體系,反應條件:50℃,50 min。
突破極限,挑戰長片段克隆
輕松應對超長片段的克隆。載體片段連接長度可達25 kb以上,無論是構建復雜的基因組文庫,還是研究超長基因的功能,它都能輕松搞定,讓你的實驗不再受限于片段長度。

圖5 有效克隆連接超長片段:A:重組轉化平板。載體(21 kb)和插入片段(4.5 kb)摩爾比為1:2。C:插入片段PCR鑒定電泳圖,M:10000 DNA Marker。載體量:200 ng/20 μL反應體系,反應條件:50℃,40 min。
全面兼容,無所不能
兼容未純化PCR產物、直接回收的PCR產物、低濃度的膠回收產物;適用于任何載體,兼顧粘性和平末端;可用于多片段、點突變等的克隆;可重組同源臂GC含量30%-70%的接頭片段。
客戶反饋
客戶S*數據反饋:三片段連接性能好于競品B,菌落數多,陽性率100%

圖6 客戶反饋,有效克隆連接三片段:A-D:重組轉化平板。載體(4 kb)和插入片段(3片段大小為1-3 kb)。10μL低反應體系,優于競品B。
客戶W*數據反饋:四片段連接性能好,菌落數多,陽性率85%以上

圖7 客戶反饋,有效克隆連接四片段:A:重組轉化平板。載體(3 kb)和插入片段(200 bp、200 bp、1200 bp、1400 bp)。6μL低反應體系。
Arcegen通用一步法克隆試劑盒,為科研人員節省了大量的時間和精力,還提高了實驗的成功率和準確性,讓克隆實驗變得輕松又高效!
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| 中文名稱 | 英文名稱 | 產品貨號 |
| 通用一步法克隆試劑盒(1-7片段) | 1-7Fragments One Step Cloning Kit | N132081 |
