近幾年類器官技術(shù)正在重塑生物醫(yī)學(xué)研究范式,成為精準(zhǔn)醫(yī)療不可替代的“活標(biāo)本”模型。然而,由于樣本差異大、培養(yǎng)成本高、操作容錯低等原因,增加了類器官培養(yǎng)的不確定性。
腸道類器官自 2009 年首次成功構(gòu)建以來,技術(shù)迭代已超 10 年,并且憑借 “低門檻、高成功率、強(qiáng)實用性” 的組合優(yōu)勢,成為新手入門類器官培養(yǎng)的理想選擇。
小鼠腸道類器官
低成本高回報的科研“新手村”,7天練就類器官全能戰(zhàn)士!
01 低成本開啟實驗
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樣本來源豐富:小鼠作為模式生物,不論自己飼養(yǎng)還是直接購買都很方便。
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隱窩細(xì)胞量充足:單只小鼠小腸可分離大量隱窩,一次可接種10-8個孔。
02 培養(yǎng)周期短
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5-7天見成果:小鼠小腸類器官接種后5-7天即可完成原代培養(yǎng),顯著短于其他類器官(7-10天)。
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近岸蛋白提供即用型小鼠腸道類器官培養(yǎng)試劑盒,實現(xiàn)4-7天完成原代培養(yǎng)

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4-7天養(yǎng)出類器官
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即用型,配制方便
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無血清體系,批間穩(wěn)定
03 鍛煉組織處理能力
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處理復(fù)雜組織:需精細(xì)刮除腸絨毛、反復(fù)清洗去除腸內(nèi)容物、EDTA冰上消化維持細(xì)胞活力等操作,其處理過程的復(fù)雜程度遠(yuǎn)超其他組織;
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精度要求高:需要嚴(yán)格控制組織消化的時間以及機(jī)械吹打的力度,保證既能夠分離出隱窩,又不會破壞隱窩的固有結(jié)構(gòu);
04 形態(tài)特征鮮明
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標(biāo)志性出芽結(jié)構(gòu):小鼠小腸類器官在培養(yǎng)過程中會呈現(xiàn)典型出芽結(jié)構(gòu),結(jié)腸類器官經(jīng)誘導(dǎo)分化后也可形成類似的出芽(見下圖);
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而其他類器官(如胰腺、子宮內(nèi)膜等)多表現(xiàn)為均質(zhì)球狀或囊狀,形態(tài)單一且缺乏動態(tài)結(jié)構(gòu)變化(見下圖)。


圖:小鼠小腸和結(jié)腸類器官明場圖



圖:小鼠膽管、胰腺、子宮內(nèi)膜類器官,形態(tài)相近
05 各個培養(yǎng)階段特征明顯
腸道培養(yǎng)基獨具的優(yōu)勢,是每個階段都能觀察到形態(tài)的變化,使實驗的失敗與成功皆“有跡可循”:
隱窩分離(0h):
成功標(biāo)志為得到大量的隱窩結(jié)構(gòu)

接種(2-4h):
隱窩變圓,說明提取的隱窩保持了活力

中期(3天):
應(yīng)形成球形結(jié)構(gòu),小腸會有部分出芽

成熟期(4-5天):
大部分出現(xiàn)典型的芽狀結(jié)構(gòu)。

06 無菌操作要求高
微生物挑戰(zhàn):腸道內(nèi)含大量微生物,是無菌操作的試煉。操作中需嚴(yán)格使用含1%雙抗的DPBS反復(fù)清洗,對于無菌操作要求極高。
正是因為小鼠腸道類器官培養(yǎng)的以上特點,使其成為類器官入門訓(xùn)練的理想選擇。以嚴(yán)格驗證為基礎(chǔ),近岸蛋白精心挑選類器官培養(yǎng)實驗中必備的試劑,組成類器官培養(yǎng)套裝,開學(xué)特惠,幫助新手低成本快速入門,培養(yǎng)無憂。

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