Western blot是一種常用的實(shí)驗(yàn)技術(shù)，用于檢測(cè)和分析蛋白質(zhì)的存在和表達(dá)水平。Western blot包括蛋白質(zhì)提取、電泳分離、轉(zhuǎn)膜、免疫染色等步驟。下面是一些常用的Western blot相關(guān)緩沖液（Buffer）配方。
1.RIPA緩沖液：
RIPA緩沖液是一種用于蛋白質(zhì)提取的常用緩沖液，可以有效地裂解細(xì)胞膜并釋放蛋白質(zhì)。以下是一種常用的RIPA緩沖液配方：
-氯化鈉（NaCl）：150mM
- 三羥甲基氧甲烷（Tris） pH 7.4: 50 mM
-適量氫氧化鈉（NaOH）調(diào)整pH值
- 二硫化苯甲醇（β-mercaptoethanol） 或 DTT：1%
- 甘油（glycerol）：1%
-磷酸鹽緩沖液：10mM
-磷酸二氫鉀（KH2PO4）：1.5mM
-多普酰轉(zhuǎn)酶抑制劑（PMSF）：1mM
-乙二胺四乙酸二鈉鹽（EDTA）：1mM
-硫酸鎂（MgSO4）：1mM
2.SDS-凝膠電泳緩沖液：
SDS-凝膠電泳是Western blot的重要步驟之一，SDS-凝膠電泳緩沖液配方：
- Tris酸：25 mM
- 甘氨酸（Glycine）：250 mM
-SDS：0.1%
-水：適量
3.轉(zhuǎn)膜緩沖液：
轉(zhuǎn)膜緩沖液用于將電泳分離得到的蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)移到膜上進(jìn)行進(jìn)一步的分析。配方如下：
-二甲基亞砜（DMSO）：20%
-甘氨酸：192mM
-氯酸鈉（NaClO3）：20mM
- Tris酸：25 mM
-水：適量
4.阻斷緩沖液：
阻斷緩沖液用于在免疫染色之前預(yù)防非特異性結(jié)合，配方如下：
-牛血清蛋白（BSA）：3-5%
-牛血清白蛋白（BSA）：0.1-0.3%
-磷酸鹽緩沖液：10mM
- Triton X-100或Tween-20：0.1-0.5%
-NaN3：0.01-0.02%
5.抗體染色緩沖液如下配制：
-磷酸鹽緩沖液：10mM
-硼酸：1mM
-EDTA：5mM
- Tween-20：0.1-0.2%
-低脂牛奶粉（非脂奶粉）：5-10%
-NaN3：0.02%
備注:以上都是常規(guī)基本配方，可能需要根據(jù)實(shí)驗(yàn)的具體要求進(jìn)行調(diào)整。不同實(shí)驗(yàn)室和研究人員可能會(huì)根據(jù)實(shí)際需要進(jìn)行配方上的調(diào)整。
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