在重組蛋白的表達純化中，通常會通過添加融合標簽（如MBP、His、GST）的方式來提高目標蛋白的可溶性并促進其正確折疊等。
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MBP（Maltose Binding Protein）標簽：能顯著提高蛋白質的溶解性和穩(wěn)定性，從而提高產(chǎn)量。
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His（Histidine）標簽：廣泛用于通過固定化金屬親和層析（IMAC）純化重組蛋白。His標簽的優(yōu)勢有：標簽本身分子量小、對重組蛋白的功能和應用幾乎沒有影響，且具有較低的免疫原性。
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GST（Glutathione S-Transferase）標簽：能夠增強融合蛋白的可溶性、促進表達，并且方便純化和后續(xù)實驗操作。通過GST標簽與固定化的谷胱甘肽親和作用，能夠高效地從表達體系中分離純化融合蛋白，并且有助于保持蛋白的生物活性和抗原性。
根據(jù)實際需求，某些融合標簽需要被去除。使用特定的蛋白酶精準、高效地去標簽對于獲得結構、功能“原汁原味”的目標蛋白至關重要。常用的蛋白酶如下表所示：
常見的用于融合標簽切除的蛋白酶對比
TEV蛋白酶（TEV Protease，目錄號：PE004）來源于煙草蝕紋病毒（Tobacco Etch Virus, TEV），具備很高的位點特異性，相比凝血酶、Factor Xa和腸激酶等蛋白酶，TEV酶對底物序列的識別更為精準，常用于從融合蛋白中去除標簽，如 GST、MBP、His 等。
TEV酶可特異性識別七肽序列：
Glu-Asn-Leu-Tyr-Phe-Gln-↓-Gly/Ser（ENLYFQ↓G/S）
TEV酶特異性識別序列和切割位點示意圖
產(chǎn)品亮點
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專一性強，幾乎無非特異性切割，保證蛋白完整性。
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反應溫和，適用于大多數(shù)蛋白；在 4–30°C 下均表現(xiàn)穩(wěn)定活性，適配更廣泛體系。
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切割后，目的蛋白的N端僅保留一個額外的 Gly 或 Ser 殘基。
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采用大腸桿菌表達，純度達99%；帶 His-tag，可通過 Ni-NTA 輕松去除酶殘留。
使用建議
1× TEV Reaction Buffer: 50 mM Tris-HCl, pH 8.0, 0.5mM EDTA, 1mM DTT
酶切反應條件：在pH為5.5-8.5和溫度為4℃-30℃都有活性，一般可選擇4℃過夜或30℃反應1小時。
數(shù)據(jù)展示
每個反應添加 15μg 融合蛋白和一定量的TEV蛋白酶。30℃經(jīng)過1小時反應后用15%的 SDS-PAGE膠檢測酶切效果。
產(chǎn)品信息
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相關產(chǎn)品
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