核酸檢測，作為精準(zhǔn)醫(yī)療的“火眼金睛”，近年來在IVD領(lǐng)域，尤其是分子診斷POCT（即時(shí)檢驗(yàn)） 上發(fā)展迅猛。當(dāng)前核酸檢測的主要是 qPCR技術(shù)。它憑借超高的特異性、靈敏度以及定量能力，被公認(rèn)為分子檢測的“金標(biāo)準(zhǔn)”，也是實(shí)現(xiàn)高通量檢測的利器。然而，在過程中依賴變溫qPCR儀器、檢測耗時(shí)長以及特定實(shí)驗(yàn)室環(huán)境的要求極大地限制了qPCR技術(shù)在基層醫(yī)療機(jī)構(gòu)推廣和現(xiàn)場快速檢測中的應(yīng)用。LAMP技術(shù)，以其顛覆性的優(yōu)勢（恒溫操作、檢測時(shí)間快以及對(duì)實(shí)驗(yàn)室基礎(chǔ)設(shè)施要求低等優(yōu)勢）在POCT領(lǐng)域脫穎而出，讓核酸檢測變得更快速、更簡便、更經(jīng)濟(jì)、更易于在基層和現(xiàn)場部署！

近岸蛋白LAMP探針法試劑盒LAMP Fast Probe Kit（目錄號(hào)：E323），采用經(jīng)基因工程改造的 Bst 2.0 plus DNA 聚合酶（目錄號(hào)：E033），搭配特殊優(yōu)化的反應(yīng)體系
，可高特異性、高靈敏度地實(shí)現(xiàn)探針法LAMP，能夠用于檢測樣品中的 DNA。與Bst 2.0 DNA聚合酶相比，Bst 2.0 plus DNA聚合酶表現(xiàn)出更高的擴(kuò)增速度、產(chǎn)量和靈敏度等優(yōu)點(diǎn)。配合優(yōu)化的反應(yīng)緩沖液，可抑制非特異性擴(kuò)增，顯著提升擴(kuò)增效率，只需加入引物探針和模板即可, 通常在30 min內(nèi)便可得到擴(kuò)增結(jié)果。檢測通過熒光信號(hào)實(shí)時(shí)監(jiān)測，靈敏度高，重復(fù)性好。

30分鐘內(nèi)獲得指數(shù)級(jí)擴(kuò)增，熒光信號(hào)同步釋放

探針精準(zhǔn)切割，假陽性無處藏身

適配病原體檢測，多重場景精準(zhǔn)覆蓋

01 高效的擴(kuò)增性能

以嗜熱芽孢桿菌基因組（GC~50%）為模板進(jìn)行10倍梯度稀釋，使用近岸蛋白E323和市售品牌A同類產(chǎn)品進(jìn)行檢測。結(jié)果顯示，近岸蛋白E323的反應(yīng)速度快于品牌A；檢測靈敏度上，近岸蛋白E323和品牌A均能檢測到10 copies/test 靶標(biāo)DNA。

圖1紅色曲線：近岸蛋白E323；粉紫色曲線：品牌A。濃度梯度依次為：1-1.0E05 copies/Test、2-1.0E04 copies/Test、3-1.0E03 copies/Test、4-1.0E02 copies/Test、5-1.0E01 copies/Test、6-NTC

02 高特異性

對(duì)2份無酶水進(jìn)行檢測，24個(gè)重復(fù)均無異常起峰,排除假陽性干擾。因此近岸蛋白E323在抑制非特異擴(kuò)增上性能更好。

圖2 陰性水（NTC）對(duì)照檢測

03 重復(fù)性好

以嗜熱芽孢桿菌基因組（GC~50%）為模板1.0E03 copies濃度下做10次重復(fù)試驗(yàn)。結(jié)果顯示，所有擴(kuò)增曲線擬合度高，表明擴(kuò)增效率一致；CV值均小于3%，表明實(shí)驗(yàn)具有良好的重復(fù)性和數(shù)據(jù)一致性，檢測結(jié)果穩(wěn)定可靠。

圖3 近岸蛋白E323的重復(fù)性試驗(yàn)結(jié)果

04 穩(wěn)定性

在LAMP體系中測試E323熱加速后的試劑與-20℃正常保存試劑的性能。結(jié)果顯示：E323試劑經(jīng)37℃熱加速處理7天的檢測性能與-20℃保存的試劑高度吻合（陽性樣本檢出率維持穩(wěn)定-Ct值偏差≤0.5），且反應(yīng)體系未出現(xiàn)非特異性擴(kuò)增條帶或假陽性信號(hào)，表現(xiàn)出優(yōu)異的穩(wěn)定性。

圖4 近岸蛋白E323的加速穩(wěn)定性試驗(yàn)結(jié)果（紅色曲線：E323 37℃ 7d；綠色曲線：E323-20℃）

面對(duì)將樣品運(yùn)輸?shù)綄I(yè)實(shí)驗(yàn)室成本高昂、地理位置不便、存在時(shí)間敏感等限制的情況，為了滿足客戶對(duì)多元化POCT解決方案的持續(xù)需求，近岸蛋白推出了基于恒溫?cái)U(kuò)增LAMP的系列產(chǎn)品（LAMP檢測方法選擇指南，近岸蛋白解鎖“快準(zhǔn)穩(wěn)”全場景方案）。為了讓大家更好的選擇合適的產(chǎn)品，從方法學(xué)上整理出了不同產(chǎn)品之間的差異，大家可根據(jù)需求選擇適合的產(chǎn)品。