在乳腺癌研究領域，HCC1954細胞系作為一種重要的人源性乳腺導管癌模型，被廣泛應用于藥物篩選、分子機制探索及腫瘤生物學行為研究。如果您正在尋找穩定、可靠且經過嚴格質控的HCC1954細胞及相關培養支持，金源康生物憑借多年的細胞培養與生物制品研發經驗，為你提供從細胞復蘇、傳代到凍存的全流程產品與服務，助你高效推進科研進程。
1. HCC1954細胞系基本信息
1.1細胞介紹
HCC1954是一種上皮細胞系，于1995年從一位61歲亞洲女性的原發性IIA期、3級浸潤性導管癌中分離而來，該癌癥無淋巴結轉移。
1.2細胞參數表
告別HCC1954培養難題：從穩復蘇到精凍存，HCC1954細胞培養研究
在乳腺癌研究領域，HCC1954細胞系作為一種重要的人源性乳腺導管癌模型，被廣泛應用于藥物篩選、分子機制探索及腫瘤生物學行為研究。如果您正在尋找穩定、可靠且經過嚴格質控的HCC1954細胞及相關培養支持，金源康生物憑借多年的細胞培養與生物制品研發經驗，為你提供從細胞復蘇、傳代到凍存的全流程產品與服務，助你高效推進科研進程。
1. HCC1954細胞系基本信息
1.1細胞介紹
HCC1954是一種上皮細胞系，于1995年從一位61歲亞洲女性的原發性IIA期、3級浸潤性導管癌中分離而來，該癌癥無淋巴結轉移。
1.2細胞參數表
1.3質控信息表
2. 培養操作
2.1 復蘇培養操作
（1）恒溫水浴鍋預熱至37℃備用，或者細胞復蘇儀開機預熱準備；
（2）準備15ml離心管，并向其中加入8ml完全培養基（JYK-CT-0153M）待用；
（3）將細胞凍存管從-80℃冰箱或液氮中取出，放入PE手套中，迅速投入恒溫水浴鍋中或者直接置于細胞復蘇儀中；
（4）在恒溫水浴鍋中，用力搖晃凍存管，使其在1分鐘內融化；在細胞復蘇儀中，按照程序操作即可；
（5）用紙巾或無塵布擦拭水漬，75%酒精消毒后轉移至生物安全柜或者超凈工作臺。用移液槍吸取細胞懸液，緩慢滴加到步驟2中準備好的離心管；
（6）1000rpm離心5min；
（7）棄上清，用新鮮完全培養基（JYK-CT-0153M）重懸細胞，混勻取樣20ul計數后，根據實驗需要接種至新的無菌培養器皿中；
（8）鏡檢細胞狀態，拍攝100x、200x照片各3張；
（9）置于37℃，5%CO2培養箱中進行培養，24h后鏡檢觀察細胞復蘇情況（貼壁情況）。
2.2 傳代培養操作
（1）取培養中的細胞，鏡下觀察細胞匯合度和生長狀態，若細胞匯合至90%以上，即可傳代，拍攝100x、200x照片各3張；
（2）去除培養上清，加入PBS（JYK-SH-001）清洗細胞（T25瓶，加入5ml；T75瓶，加入10ml）；
（3）加入0.25%胰酶（JYK-SX-002）（T25瓶，加入2ml；T75瓶，加入4ml），放入培養箱中或者室溫下消化解離3min左右，可用顯微鏡觀察狀態，若觀察到細胞離散成單個圓形、細胞間出現間隙、呈沙狀移動，并懸浮在培養液中即可；
（4）加入完全培養基（JYK-CT-0153M）（T25瓶，加入5ml；T75瓶，加入10ml）終止消化，反復吹打瓶底和細胞，使其充分懸浮并吸取到離心管中，用PBS（JYK-SH-001）（T25瓶，加入5ml；T75瓶，加入10ml）再洗培養瓶一次，將兩次液體收集到一支離心管中；
（5）1000rpm離心10min；
（6）離心后棄上清，輕輕敲擊細胞沉淀，使其散開，加入1ml完全培養基（JYK-CT-0153M）稀釋并充分混勻；
（7）計數，吸取細胞液20ul，加入20ul臺盼藍染液，混合均勻后吸取20ul混合液加入到細胞計數板計數，根據接種密度計算所需細胞液體積；
（8）根據實驗需要，吸取一定量的細胞液加入到培養瓶，加入完全培養基（JYK-CT-0153M）（T25瓶，加入10ml；T75瓶，加入20ml），輕輕前后搖勻，在瓶身寫好細胞名、培養代數、日期、姓名；
（9）鏡下觀察看是否已經搖勻，無誤后放入培養箱37℃、5% CO2、90%濕度條件下培養。
2.3 凍存操作
（1）取培養中的細胞，鏡下觀察細胞匯合度和生長狀態，若細胞匯合至90%以上，即可傳代，拍攝100x、200x照片各3張；
（2）去除培養上清，加入PBS（JYK-SH-001）清洗細胞（T25瓶，加入5ml；T75瓶，加入10ml）；
（3）加入0.25%胰酶（JYK-SX-002）（T25瓶，加入2ml；T75瓶，加入4ml），放入培養箱中或者室溫下消化解離3min左右，可用顯微鏡觀察狀態，若觀察到細胞離散成單個圓形、細胞間出現間隙、呈沙狀移動，并懸浮在培養液中即可；
（4）加入完全培養基（JYK-CT-0153M）（T25瓶，加入5ml；T75瓶，加入10ml）終止消化，反復吹打瓶底和細胞，使其充分懸浮并吸取到離心管中，用PBS（JYK-SH-001）（T25瓶，加入5ml；T75瓶，加入10ml）再洗培養瓶一次，將兩次液體收集到一支離心管中；
（5）1000rpm離心10min；
（6）離心后棄上清，輕輕敲擊細胞沉淀，使其散開，加1ml預冷凍存液（JYK-SD-003）混勻；
（7）計數，吸取細胞液20ul，加入20ul臺盼藍染液，混合均勻后吸取20ul混合液加入到細胞計數板計數；
（8）根據計數結果，添加凍存液（JYK-SD-003），調整細胞最終密度為3×106/ml；
（9）將細胞分裝入凍存管中，每管1ml；
（10）凍存管標記細胞名稱，細胞代數、細胞密度、凍存時間，操作者。
（11）按照凍存程序進行細胞凍存。參考凍存程序見下表：
3. 注意事項
3.1補充生長因子：可額外添加5-10 ng/mL的表皮生長因子（EGF）或胰島素-轉鐵蛋白-硒（ITS）補充劑，促進細胞增殖。
3.2接種密度：傳代時接種密度建議為5×10?至1×10? cells/cm²，避免密度過低導致生長緩慢或密度過高引起接觸抑制。
4. 相關產品
綜上所述，HCC1954細胞系作為乳腺癌研究的關鍵工具，其規范培養與科學使用對于實驗結果的可靠性至關重要。無論是在細胞模型的建立、培養基的優化，還是相關試劑的選擇上，金源康生物始終致力于為科研工作者提供專業、系統的一站式解決方案。未來，金源康生物將繼續攜手廣大科研用戶，共同推動腫瘤研究領域的創新與發展。