CAR-T是一種將患者自身T細(xì)胞通過基因工程改造，使其表達(dá)具有特異性抗原識別能力的嵌合抗原受體（CAR），從而具備靶向并殺傷腫瘤細(xì)胞的能力的療法^[1]。在血液腫瘤領(lǐng)域，CAR-T被譽(yù)為“活的藥物”，徹底改變了某些復(fù)發(fā)/難治患者的生存結(jié)局，成為腫瘤免疫治療最具突破性的手段之一。

CAR結(jié)構(gòu)一般包括：胞外抗原識別區(qū)（多為來源于抗體的ScFv結(jié)構(gòu)）、跨膜區(qū)、胞內(nèi)激活信號區(qū)（如CD3ζ, CD28, 4-1BB等）。經(jīng)過病毒載體轉(zhuǎn)染和體外擴(kuò)增后，CAR-T細(xì)胞被回輸至患者體內(nèi)，可以識別腫瘤細(xì)胞表面特定抗原并發(fā)動攻擊，達(dá)到精準(zhǔn)治療的目的^[2]。

圖1 . CAR的組成部分^[2]

CAR-T作為細(xì)胞藥物，其治療效果高度依賴于制備過程中細(xì)胞的質(zhì)量。其中，“陽性表達(dá)率”是最基礎(chǔ)也最關(guān)鍵的一個指標(biāo)。如果CAR沒有正確表達(dá)在T細(xì)胞表面，那它就無法識別腫瘤，等同于“啞火”。因此，在CAR-T制備的研究和臨床環(huán)節(jié)，必須通過檢測確認(rèn)T細(xì)胞是否成功表達(dá)了CAR分子，并量化表達(dá)強(qiáng)度、純度等。

2018年中檢院發(fā)布《CAR-T細(xì)胞治療產(chǎn)品質(zhì)量控制檢測研究及非臨床研究考慮要點》，其中規(guī)定：“對于CAR-T細(xì)胞來說，發(fā)揮腫瘤殺傷作用的有效成分是CAR陽性的T細(xì)胞，CAR-T細(xì)胞產(chǎn)品的包裝規(guī)格及臨床使用劑量是以CAR-T陽性細(xì)胞數(shù)標(biāo)示的，因此，必須檢測CAR轉(zhuǎn)染陽性率。應(yīng)采用流式細(xì)胞法檢測CAR轉(zhuǎn)染陽性率，目前有針對CAR不同結(jié)構(gòu)區(qū)域的檢測方法，包括針對 CAR 抗原結(jié)合位點的，如CD19抗原或抗ScFv抗體，或針對輕鏈或鉸鏈區(qū)的抗Fab或 Protein L，與其它兩種方法相比，針對抗原結(jié)合部位的 CAR 陽性率檢測方法具有更好的專屬性。”

為助力CAR-T研究及生產(chǎn)環(huán)節(jié)的質(zhì)量控制，近岸蛋白推出一系列針對不同靶點的CAR-T陽性細(xì)胞檢測試劑盒，涵蓋主流靶點CD19、BCMA、MSLN等。

• 特異識別CAR結(jié)構(gòu)，避免假陽性

• 適用于流式檢測，可快速評估陽性表達(dá)率

• 血液樣本中驗證穩(wěn)定性，適用于臨床樣本

• 支持多種熒光標(biāo)記形式，包含Alexa 647、APC、PE等多種常用染料

   

我們采用抗原-抗體特異性識別方式，規(guī)避傳統(tǒng)抗體交叉識別帶來的誤判風(fēng)險，使CAR表達(dá)檢測更真實、更可信。