2025年7月24日,廣東省佛山五區(qū)衛(wèi)生健康局通報(bào),佛山全市累計(jì)報(bào)告基孔肯雅熱確診病例3645例。為應(yīng)對(duì)疫情,佛山市多個(gè)區(qū)縣發(fā)布《告全體市民書》,號(hào)召公眾積極行動(dòng),及時(shí)清除蚊蟲,殺滅成蚊。
相信這幾天大家已經(jīng)從各個(gè)途徑了解了基孔肯雅熱是什么了,那我們我們來(lái)說(shuō)一說(shuō)如何預(yù)防。目前沒有針對(duì)基孔肯雅熱的抗病毒藥物,也無(wú)疫苗可預(yù)防,所以防蚊滅蚊、避免叮咬是防護(hù)的關(guān)鍵。基孔肯雅熱的潛伏期一般是1至12天,通常是3至7天。所以研發(fā)快速、靈敏且特異的早期診斷技術(shù)至關(guān)重要,唯有實(shí)現(xiàn)早發(fā)現(xiàn)與早干預(yù),方能有效阻斷疾病傳播鏈,將疫情防控在一線,切實(shí)維護(hù)公眾健康。
01 一管法qPCR mix,直接加入引物模板即可
近岸蛋白推出的適用于RNA模板的一步法多重?zé)晒舛縬RT-PCR檢測(cè)試劑盒(目錄號(hào):E695)。特殊工藝處理的熱啟動(dòng)Taq DNA聚合酶和熱穩(wěn)定逆轉(zhuǎn)錄酶,能夠在更快速的程序下進(jìn)行高性能多重?cái)U(kuò)增。
產(chǎn)品優(yōu)勢(shì)
2)高靈敏度:可進(jìn)行對(duì)低濃度樣本檢出;
3)多重檢測(cè):同一反應(yīng)管中可同時(shí)進(jìn)行4-6個(gè)靶標(biāo)的檢測(cè);
4)高耐受性:可適用于血液、唾液等各種復(fù)雜樣本環(huán)境;
5)防污染體系:體系中添加dUTP/UDG防污染系統(tǒng),降低假陽(yáng)性。
性能展示
01 穩(wěn)定性好
使用近岸蛋白E695進(jìn)行37℃加速實(shí)驗(yàn),以293細(xì)胞RNA為模板(100ng,10ng,1ng,100pg)。加速處理后的試劑跟-20℃保存的試劑對(duì)比發(fā)現(xiàn),兩者的擴(kuò)增曲線基線平穩(wěn),拐點(diǎn)清楚,指數(shù)期明顯,曲線整體平滑,具有較好的穩(wěn)定性。

圖1 加速穩(wěn)定性測(cè)試
02 耐受性好
在反應(yīng)體系配制的時(shí)候,加入1μl10%全血作為雜質(zhì)背景驗(yàn)證擴(kuò)增的耐受性。使用近岸蛋白E695驗(yàn)證常規(guī)體系和耐雜體系對(duì)模板的擴(kuò)增。結(jié)果發(fā)現(xiàn),常規(guī)體系與耐雜體系的擴(kuò)增曲線高度吻合(30min內(nèi)陽(yáng)性樣本檢出率維持穩(wěn)定-Ct值偏差≤0.5),且反應(yīng)體系未出現(xiàn)非特異性擴(kuò)增條帶或假陽(yáng)性信號(hào),表現(xiàn)出優(yōu)異的一致性。

圖2 常規(guī)體系和耐雜體系比較
02 LAMP讓檢測(cè)更簡(jiǎn)單,讓“兇手”現(xiàn)形一線
LAMP技術(shù),以其顛覆性的優(yōu)勢(shì)(恒溫操作、檢測(cè)時(shí)間快以及對(duì)實(shí)驗(yàn)室基礎(chǔ)設(shè)施要求低等優(yōu)勢(shì))在POCT領(lǐng)域脫穎而出,讓核酸檢測(cè)變得更快速、更簡(jiǎn)便、更經(jīng)濟(jì)、更易于在基層和現(xiàn)場(chǎng)部署!
近岸蛋白可提供全系列的LAMP檢測(cè)試劑。以RNA樣本為主的兩款檢測(cè)試劑盒助力分子診斷POCT即時(shí)快檢產(chǎn)品開發(fā)-顯色法的2×Indicator RT-LAMP Master Mix with Dye (for-Lyo)(目錄號(hào):FLE228),熒光染料法的2×RT-LAMP Kit with Dye(目錄號(hào):E220),其中,F(xiàn)LE228試劑盒均不含甘油及其他影響凍干的成分,包含保護(hù)劑、賦形劑等試劑,可用于凍干樣品的制備。
產(chǎn)品優(yōu)勢(shì)
2)擴(kuò)增速度快:通常在30min內(nèi)便可得到擴(kuò)增結(jié)果;
3)可凍干:兩款產(chǎn)品均可用于制作凍干粉或凍干小球;
性能展示
顯色法的2×Indicator RT-LAMP Master Mix with Dye (for-Lyo)(FLE228)
01 優(yōu)異的反應(yīng)性能
FLE228為紅黃變色反應(yīng),在擴(kuò)增完成后,陽(yáng)性結(jié)果為黃色,陰性結(jié)果為紅色,通過(guò)肉眼觀察即可對(duì)反應(yīng)結(jié)果進(jìn)行判讀。以SARS-CoV2 ORF1ab基因,靈敏度可達(dá)到100fg/Test;NTC沒有顯示出擴(kuò)增信號(hào),表明反應(yīng)體系具有良好的特異性,沒有非特異性擴(kuò)增。

圖3 SARS-CoV2 ORF1ab基因檢測(cè)
02 客戶實(shí)測(cè)
客戶使用FLE228的核心酶自研搭建反應(yīng)體系。經(jīng)過(guò)兩次凍干復(fù)溶后檢測(cè),發(fā)現(xiàn)前后陽(yáng)性檢測(cè)時(shí)間差異不大,25min即可穩(wěn)定判讀結(jié)果。

圖4 客戶實(shí)測(cè)結(jié)果展示
熒光染料法的2×RT-LAMP Kit with Dye(E220)
01 優(yōu)異的反應(yīng)性能
分別以SARS-CoV2 ORF1ab基因和N基因?yàn)榘袠?biāo),同時(shí)和供應(yīng)商N(yùn)的產(chǎn)品一起檢測(cè)。結(jié)果顯示SARS-CoV2 N基因,靈敏度均可達(dá)到5×102copies/Test;SARS-CoV2 ORF1ab基因,靈敏度均可達(dá)到1×103copies/Test;反應(yīng)時(shí)間上E220快于供應(yīng)商N(yùn)(陽(yáng)性Ct值大大提前);同時(shí)NTC沒有顯示出擴(kuò)增信號(hào),表明反應(yīng)體系具有良好的特異性,沒有非特異性擴(kuò)增。

圖5 SARS-CoV2 ORF1ab/N基因檢測(cè)
02 客戶實(shí)測(cè)
客戶樣本為甲流國(guó)家參考品及咽拭子真實(shí)樣本,臨床樣本投入量大約是5ng。測(cè)試結(jié)果發(fā)現(xiàn),E220比供應(yīng)商N(yùn)、供應(yīng)商Y的擴(kuò)增效率要高,和供應(yīng)商X的起峰時(shí)間差不多,但E220的信號(hào)值更高。

圖6 客戶實(shí)測(cè)結(jié)果展示