構建MTB突變菌株(基因敲除法)
采用噬菌體介導的同源重組進行基因敲除:首先構建同源交換位點(AES),隨后將其整合到結核分枝桿菌噬菌體基因組,獲得噬菌粒(phasmid);將噬菌粒導入恥垢分枝桿菌,獲得整合有同源交換位點的重組噬菌體,經體外擴增獲得高滴度的重組噬菌體,對結核分枝桿菌進行轉染;
功能菌株改造
我們自主開發的42℃熱誘導/阿拉伯糖誘導重組系統能夠更加省時省力地對質粒、染色體和細菌人工染色體等進行改造。http://www.gdbiotec.com/taxonomy/term/33/all
過表達穩定細胞系建立
利用具有抗性篩選基因的常規表達載體轉染細胞,通過抗性篩選,建立穩定高表達外源基因的細胞系;利用具有抗性篩選基因的慢病毒液感染細胞,通過抗性篩選,建立穩定高表達外源基因的細胞系。
