淋巴細(xì)胞檢測(cè)技術(shù)是免疫學(xué)研究和臨床診斷中的重要工具,用于分析淋巴細(xì)胞的數(shù)量、亞群分布、功能狀態(tài)及表面標(biāo)志物表達(dá)等。以下是常用的淋巴細(xì)胞檢測(cè)技術(shù)及其原理、應(yīng)用和特點(diǎn):
一、流式細(xì)胞術(shù)(Flow Cytometry)
原理
通過(guò)熒光標(biāo)記的抗體識(shí)別不同淋巴細(xì)胞亞群,利用激光檢測(cè)細(xì)胞大?。ㄇ跋蛏⑸?,F(xiàn)SC)、粒度(側(cè)向散射,SSC)及熒光信號(hào),實(shí)現(xiàn)多參數(shù)分析。
應(yīng)用
免疫分型:鑒定T細(xì)胞 (CD3+)、B細(xì)胞 (CD19+)、NK細(xì)胞 (CD16+CD56+) 等亞群。
功能分析:檢測(cè)細(xì)胞活化標(biāo)志物(如CD25、CD69)、細(xì)胞內(nèi)細(xì)胞因子 (如IFN-γ、IL-4) 或凋亡相關(guān)蛋白(如Annexin V)。
稀有細(xì)胞檢測(cè):如循環(huán)腫瘤細(xì)胞 (CTCs) 或HIV潛伏感染細(xì)胞。
優(yōu)勢(shì)
● 高通量、多參數(shù)分析,可同時(shí)檢測(cè)數(shù)十種標(biāo)志物;
● 靈敏度高,可分析低豐度細(xì)胞群體。
局限性
● 依賴高質(zhì)量抗體和嚴(yán)格補(bǔ)償設(shè)置;
● 需專業(yè)操作和數(shù)據(jù)分析技能。
二、免疫分型(Immunophenotyping)
原理
基于流式細(xì)胞術(shù)或免疫熒光顯微鏡,通過(guò)熒光標(biāo)記抗體識(shí)別淋巴細(xì)胞表面標(biāo)志物(如CD3、CD4、CD8、CD20)。
應(yīng)用
HIV/AIDS監(jiān)測(cè):定量CD4+ T細(xì)胞絕對(duì)計(jì)數(shù),評(píng)估免疫狀態(tài)。
白血病/淋巴瘤分型:通過(guò)CD抗原組合確定細(xì)胞起源(如CD45/CD3/CD19區(qū)分B/T細(xì)胞)。
自身免疫病診斷:檢測(cè)異常淋巴細(xì)胞亞群(如CD4+/CD8+比值失衡)。
常用標(biāo)志物組合
疾病類型 |
關(guān)鍵標(biāo)志物 |
HIV監(jiān)測(cè) |
CD3+CD4+(輔助T細(xì)胞) |
急性淋巴細(xì)胞白血病 |
CD10+CD19+(B-ALL) |
多發(fā)性骨髓瘤 |
CD38+CD138+(漿細(xì)胞) |
三、細(xì)胞計(jì)數(shù)與自動(dòng)化分析
原理
血球計(jì)數(shù)儀:通過(guò)電阻抗或光學(xué)方法計(jì)數(shù)總淋巴細(xì)胞數(shù)量。
自動(dòng)化血液分析儀(如Sysmex、Abbott):結(jié)合多角度散射光和熒光染色,區(qū)分淋巴細(xì)胞、中性粒細(xì)胞和單核細(xì)胞。
應(yīng)用
● 快速篩查感染(如淋巴細(xì)胞增多癥或減少癥);
● 監(jiān)測(cè)放化療后淋巴細(xì)胞恢復(fù)情況。
優(yōu)勢(shì)
● 操作簡(jiǎn)便、快速(<5分鐘/樣本);
● 適合大批量樣本檢測(cè)。
局限性
無(wú)法區(qū)分淋巴細(xì)胞亞群或功能狀態(tài)。
四、顯微鏡檢查
原理
瑞氏染色(Wright-Giemsa):通過(guò)光學(xué)顯微鏡觀察細(xì)胞形態(tài),識(shí)別異常淋巴細(xì)胞(如異型淋巴細(xì)胞)。
免疫熒光顯微鏡:結(jié)合熒光抗體標(biāo)記,定位特定抗原(如EBV感染的CD21+ B細(xì)胞)。
應(yīng)用
● 診斷傳染性單核細(xì)胞增多癥(異型淋巴細(xì)胞>10%);
● 評(píng)估骨髓涂片中的淋巴細(xì)胞發(fā)育異常。
優(yōu)勢(shì)
直觀顯示細(xì)胞形態(tài)和空間分布,無(wú)需復(fù)雜設(shè)備。
局限性
● 主觀性強(qiáng),依賴經(jīng)驗(yàn);
● 無(wú)法定量分析亞群比例。
五、分子生物學(xué)技術(shù)
1. PCR/qPCR
● 應(yīng)用:檢測(cè)淋巴細(xì)胞特異性基因(如TCR重排分析白血病克隆性)或病毒核酸(如HHV-8、EBV)。
● 優(yōu)勢(shì):高靈敏度,可檢測(cè)低豐度靶標(biāo)。
2. 流式細(xì)胞術(shù)微球芯片(Luminex)
● 原理:基于微球捕獲技術(shù),同時(shí)檢測(cè)多種細(xì)胞因子或趨化因子(如IL-2、IL-6、TNF-α)。
● 應(yīng)用:分析淋巴細(xì)胞分泌功能。
3. 單細(xì)胞測(cè)序(scRNA-seq)
● 原理:對(duì)單個(gè)淋巴細(xì)胞進(jìn)行轉(zhuǎn)錄組測(cè)序,揭示異質(zhì)性亞群。
● 應(yīng)用:研究腫瘤浸潤(rùn)淋巴細(xì)胞的克隆進(jìn)化或免疫應(yīng)答機(jī)制。
應(yīng)用淋巴細(xì)胞質(zhì)控品,實(shí)驗(yàn)室能夠有效降低假性結(jié)果風(fēng)險(xiǎn),為疾病診斷、治療監(jiān)測(cè)和科研研究提供高質(zhì)量數(shù)據(jù)支持。
質(zhì)控品的核心價(jià)值
確保數(shù)據(jù)可信度:通過(guò)比對(duì)質(zhì)控品與實(shí)驗(yàn)樣本的結(jié)果,排除操作誤差或儀器漂移的影響。
符合法規(guī)要求:滿足ISO 15189、CLIA等實(shí)驗(yàn)室認(rèn)證標(biāo)準(zhǔn)中對(duì)質(zhì)控的要求。
提升診斷信心:在臨床報(bào)告(如HIV免疫狀態(tài)、白血病分型)中提供可靠的質(zhì)控依據(jù)。
淋巴細(xì)胞亞群非定值質(zhì)控品
菁良淋巴細(xì)胞亞群非定值質(zhì)控品包含14項(xiàng)質(zhì)控項(xiàng)目,適用于市面常見(jiàn)免疫分析平臺(tái),用于實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)時(shí)的室內(nèi)質(zhì)量控制,監(jiān)測(cè)和控制臨床實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)方法的精密度。
產(chǎn)品特點(diǎn)
● 項(xiàng)目全面:復(fù)合度高,包含14項(xiàng)分析物,有效減少實(shí)驗(yàn)室必備質(zhì)控品的種類和數(shù)量;
● 醫(yī)學(xué)水平:2個(gè)水平,嚴(yán)格把控正常和異常水平檢測(cè)質(zhì)量;
● 性能穩(wěn)定:液體即用型設(shè)計(jì),提高質(zhì)控效率,滿足個(gè)性化的臨床監(jiān)測(cè)需求。
產(chǎn)品信息
產(chǎn)品貨號(hào) |
產(chǎn)品描述 |
產(chǎn)品規(guī)格 |
GW-UYTC001 |
淋巴細(xì)胞亞群非定值質(zhì)控品水平1 |
1 mL x 2 |
GW-UYTC002 |
淋巴細(xì)胞亞群非定值質(zhì)控品水平2 |
1 mL x 2 |
關(guān)于菁良
菁良科技(深圳)有限公司是全球領(lǐng)先的提供體外診斷標(biāo)準(zhǔn)品與質(zhì)控品的研發(fā)創(chuàng)新型高科技企業(yè)。
菁良通過(guò)自主研發(fā)的平臺(tái),向體外檢測(cè)行業(yè)用戶及合作伙伴提供全球領(lǐng)先的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)、第三方質(zhì)控產(chǎn)品和企業(yè)參考品服務(wù),助力提高行業(yè)檢測(cè)準(zhǔn)確率。參與多項(xiàng)由檢測(cè)領(lǐng)域行業(yè)龍頭和監(jiān)管機(jī)構(gòu)發(fā)起的標(biāo)準(zhǔn)制定工作,多次支持由臨檢中心發(fā)起的室間質(zhì)量評(píng)價(jià) (EQA)/能力驗(yàn)證項(xiàng)目。
菁良秉承著“精準(zhǔn)制標(biāo),匠心良造”的理念,懷抱著“提高體外檢測(cè)準(zhǔn)確率,助力精準(zhǔn)醫(yī)學(xué)快速發(fā)展”的愿景,致力于建立規(guī)范化的中國(guó)體外檢測(cè)金標(biāo)準(zhǔn)平臺(tái)。