??在生物制藥與基礎免疫學研究領域，單 B 細胞抗體開發技術已成為獲取高特異性、高親和力抗體的核心路徑。從技術本質而言，其通過精準分離單個 B 淋巴細胞，對編碼抗體的可變區基因進行擴增與解析，旨在還原天然抗體的重鏈（VH）與輕鏈（VL）配對，從而構建具備完整功能的重組抗體。這一技術路徑雖在理論上具備顯著優勢，卻在實際操作中遭遇諸多棘手難題。
單 B 細胞抗體開發的技術瓶頸與挑戰
微量樣本的擴增難題
單 B 細胞內 RNA 含量極低，通常僅為 10 - 50pg，這對后續的逆轉錄及 PCR 擴增提出了嚴苛要求。傳統的 RT - PCR 技術體系，在應對如此微量的起始模板時，極易因引物競爭、酶活性抑制等因素，產生擴增偏差或完全失敗，致使大量珍貴樣本中的目標抗體基因信息丟失。據相關研究統計，在低起始量（＜50pg RNA）實驗條件下，傳統方法的有效擴增率不足 30%，嚴重制約了單 B 細胞抗體開發的效率與成功率 。
抗體可變區多樣性的覆蓋困境
B 細胞受體（BCR）可變區的多樣性源于復雜的基因重組、體細胞高頻突變等生物學過程，理論上可產生 10¹² - 10¹?種不同的抗體序列。這一高度復雜性使得常規引物設計難以全面覆蓋所有可變區。在實際篩選中，由于引物與部分稀有或突變型可變區序列不匹配，導致大量具有潛在治療價值的特異性抗體序列被遺漏。例如，在針對新型病毒的抗體篩選中，因可變區覆蓋不全，可能錯過關鍵的中和抗體序列。
流程復雜性與時間成本
傳統的單 B 細胞抗體開發流程，涵蓋細胞裂解、RNA 提取、逆轉錄、多重 PCR 擴增以及產物純化等多個繁瑣步驟，且各步驟間需頻繁進行樣本轉移與處理。整個流程耗時通常超過 12 小時，不僅操作誤差風險高，而且長時間的樣本暴露增加了核酸降解與污染的可能性，進一步降低了輕重鏈配對成功的概率。研究表明，傳統多步驟流程中，輕重鏈成功配對率平均僅為 50% -70%。
技術革新：單 B 細胞擴增試劑盒的核心優勢
德泰生物研發的 Mouse/Rabbit Single B Cell Amplification Kit，憑借前沿的技術設計，直擊上述技術痛點，為單 B 細胞抗體開發提供了高效、精準的解決方案。
微量樣本的高效捕獲與擴增
該試劑盒采用了自主研發的超敏細胞裂解與逆轉錄體系，突破性地實現了以 1 - 500 個 B 細胞或 10pg - 5ng 總 RNA 作為起始模板的高效擴增。其核心在于運用了專利的核酸保護技術，通過特殊的緩沖液配方抑制細胞內源性 RNase 活性，同時優化逆轉錄酶的反應條件，確保在極低模板濃度下仍能維持高效的 cDNA 合成效率。
全面覆蓋抗體可變區多樣性
針對 BCR 可變區的復雜多樣性，試劑盒運用了先進的多重引物池設計策略。全面且精準的引物設計，有效避免了因可變區序列變異導致的擴增遺漏，使抗體可變區序列的覆蓋度達到 95% 以上，顯著提高了篩選出高特異性、高親和力抗體的概率 。
一體化擴增流程與時間優化
試劑盒采用三步法技術，將逆轉錄（RT）、預擴增（PCR1）兩個關鍵步驟整合在同一反應管內進行，這種一體化設計不僅避免了跨管操作帶來的樣本損失與污染風險，還將整個實驗流程大幅縮短至 5 小時以內。實驗驗證，該試劑盒的輕重鏈同步擴增成功率穩定維持在 90% 以上，較傳統分管擴增方法提升了約 40%，極大地提高了實驗效率與結果可靠性 。
產品信息
貨號 產品名稱 產品規格
DTT06 小鼠單B細胞擴增試劑盒 96 rxns
DTT07 兔單B細胞擴增試劑盒 96 rxns
DTT08 小鼠單B細胞表達框擴增試劑盒 96 rxns
DTT09 兔單B細胞表達框擴增試劑盒 96 rxns