
在蛋白電泳實驗中,預制膠的選擇直接影響實驗效率與結果準確性。面對市場上預制膠產品體系的多元化發展及涌現,作為科研工作者,你是否曾為 “Bis-Tris” 和 “Tris-Glycine” 這兩種預制膠的差異而困惑?本文將從技術溯源、分離范圍、緩沖體系等多個維度進行對比,以期為您的科學選擇提供參考依據!
01 兩種體系的技術溯源
Tris-Glycine體系
在SDS-PAGE凝膠電泳技術發展初期,Tris-Glycine體系憑借穩定的分離性能,成為實驗室自配膠的核心選擇,長期主導手工制膠場景。然而其致命短板在于:傳統配方下凝膠常溫保質期僅有1周,導致預制膠商業化開發陷入瓶頸。
Bis-Tris體系
2005年,Invitrogen公司推出基于Bis-Tris 體系的NuPAGETM預制膠,在 4℃下可穩定保存1年,并以美國專利US6162338構建技術壁壘。隨著專利到期,Bis-Tris技術擴散, 成為眾多預制膠公司的凝膠配方。
傳承與創新
2018年,上海萬生昊天生物技術有限公司歷經多年研發,成功攻克 Tris-Glycine體系的穩定性難題,推出可長期保存的新型預制膠產品, 并進一步優化。該技術在保留經典體系適用性高、成本低的同時,通過配方優化將保質期提升至行業主流水平, 同時克服了傳統Tris-Glycine體系處理小分子蛋白能力弱的缺點。這一成果不僅為科研用戶提供了兼顧傳統性能與便捷儲存的選擇,更標志著本土企業在電泳技術國產化進程中實現關鍵跨越。
02 分離范圍與分辨率
Tris-Glycine預制膠
分離范圍:傳統配方的Tris-Glycine PAGE膠可分離10-200 kD的蛋白。
分辨率:條帶清晰銳利。上海萬生昊天生物技術有限公司于2022年對經典Laemmli配方成功進行優化升級,取得突破性進展——優化后的Tris-Glycine預制膠能夠實現對最小5 kD蛋白的分離。
Bis-Tris預制膠
分離范圍:可兼容MOPS或MES電泳緩沖液,能實現更寬范圍分子量蛋白的分離,搭配MOPS使用更好的分離大分子蛋白(>30 kD),搭配MES使用能更好的分離小分子蛋白(<30 kD)。
分辨率:條帶清晰銳利。
03 電泳速度與穩定性
Tris-Glycine預制膠
電壓:180 V時間:60分鐘
電流動態:1塊膠的電流在75 mA左右,2塊膠的電流在150 mA左右,隨時間增加逐步降低。萬生昊天的Tris-Glycine 預制膠匹配超快電泳緩沖液,可實現200V 25分鐘超快電泳,極大提升實驗效率。
Bis-Tris預制膠
電壓:150 V時間:40-50分鐘
電流動態:1塊膠的電流在80 mA左右,2塊膠的電流在140 mA左右,隨時間增加電流逐步降低。
04 緩沖體系與兼容性
Tris-Glycine預制膠
緩沖體系:Tris-Glycine 電泳緩沖液/超快電泳緩沖液。
pH范圍:7.0-9.0(最佳7.5-8.5),緩沖容量適中。
鹽離子耐受度:高
WB轉膜方式:半干轉或濕轉
Bis-Tris預制膠
緩沖體系:MOPS/MES緩沖液,穩定性強,不易降解。
pH范圍:6.0-8.5(最佳6.5-7.5),緩沖容量更高。
鹽離子耐受度:高
WB轉膜方式:濕轉
05 使用成本
Tris-Glycine預制膠采用普通的Tris-Glycine電泳緩沖液,價格便宜。
Bis-Tris預制膠匹配專用MOPS或者MES緩沖液,成本較高。
06 運輸與保存
運輸兩者均可常溫運輸,建議收到后盡快轉入 4-8℃ 冰箱。
保質期兩者均為12個月(4-8℃)。注意:兩者均需避免 0℃ 以下冷凍。凝膠凍凝會產生氣泡和裂紋,導致報廢!
總 結
Tris-Glycine與Bis-Tris體系的關鍵性能對比如下:
共性優勢
兩體系在蛋白分辨率及預制膠保質期等核心指標上表現相當,均能滿足SDS-PAGE實驗需求。
差異化競爭力
萬生昊天生物Tris-Glycine體系通過雙版本緩沖液實現全面領先:
a. 成本優勢
常規電泳緩沖液:價格顯著低于Bis-Tris體系配套緩沖液。
超快電泳緩沖液:單價與Bis-Tris體系持平。
b. 效率突破
超快緩沖液在同等成本下,電泳速度較Bis-Tris體系提升50%以上。
綜上所述,無論從實驗成本控制維度,還是時間效率優化角度,萬生昊天Tris-Glycine體系均展現出更優的性價比。建議根據實驗場景靈活選擇常規版(預算敏感型)或超快版(高通量需求)解決方案。
