小鼠iCD1完全誘導培養基 8.29-9.29在丁香通有6折開學促銷活動。
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http://www.biomart.cn/act/201609_kaixuecuxiao_cellculture_part.htm.htm
iCD1小鼠iPS誘導完全培養基
iCD1完全培養基是一種無血清、無動物源污染、化學成分確定的高效獲得小鼠誘導多能干細胞
（iPS細胞）的培養基。該培養基可在無飼養層細胞、不分盤的條件下維持從體細胞向iPS細胞
轉化過程中的細胞生長和增殖，同時顯著加速iPS細胞誘導進程，極大地提搞iPS細胞的轉導
效率。
優點
無血清、無動物源污染、化學成分確定
體系穩定，批次重復性
支持少因子誘導體細胞重編程
極大縮短iPS誘導時間（一周），提高iPS誘導效率（10%）
使用簡便，無需添加額外的生長因子或其他添加物
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產品編號 |
品名 |
規格 |
存儲條件 |
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820210 |
iCD1完全培養基 |
100mL |
-20℃ |
iCD1培養基誘導iPS細胞操作步驟
成纖維細胞導入重編程因子->每天更換iCD1培養基->第7-8天挑取克隆
重編程效果
干細胞特異分子標記物Nanog和內源性Oct4的相對表達量被用于評價細胞整體重編程進程的快慢。
圖2a表明，在DeliCell??iCD1培養條件下，Nanog 和內源Oct4的激活明顯快于mES和KSR-BN組。
圖2b為蛋白水平上驗證多能性分子標記物的表達結果圖。
結果表明，第8天在原盤出現的重編程克隆其多能性分子標記物Cdh1，SSEA-1和Nanog均有表達。
圖2c為將mES和iCD1培養條件下第4天和第8天的培養物提取總蛋白，采用Western-blot檢測Nanog
的表達狀況，實驗結果表明，感染后第8天，在DeliCell??iCD1培養條件下， Nanog表達顯著，而
在對照組mES條件下，Nanog則未表達。該結果也進一步證明了iCD1培養條件下重編稱過程顯著
加快。
圖2 從分子水平上證明DeliCell??iCD1培養體系優于其他培養體系。
重編程后期外源因子沉默，是判斷完全重編程的一個指標。
圖3為采用紅色熒光蛋白Ds-Red用于模擬外源轉錄因子的沉默，將Ds-Red和OKS一起感染細胞，
在DeliCell??iCD1培養條件下，不同時間點，熒光顯微鏡跟蹤觀察細胞綠光（指示內源多能性
Oct4的表達）和紅光（指示外源因子的表達狀況）。
結果顯示，隨著時間的延長，綠光逐漸增強，紅光逐漸減弱，第8天基本不表達紅光，
表明重編程后期外源因子的沉默，重編程基本完成。
圖3 體細胞重編過程示蹤
4.2采用iCD1和少因子（OK或OS）誘導小鼠多能干細胞
圖4a是在DeliCell??iCD1培養條件下，OK和OS重編程克隆的原始照片和傳代照片。
圖4b表明OK和OS重編程獲得的iPS克隆表達干細胞特異性分子標記。
圖4c為Oct4/KLf4和Oct4/Sox2重編程實驗結果統計，表中給出了每次實驗計算重編程克隆的時間和
統計結果，三次試驗結果表明試驗具有較好的重復性。圖4d為OK和OS克隆注射裸鼠長出的畸胎瘤
組織切邊，組織切片中明顯的三個胚層的組織分化表明OK和OS克隆具備向三個胚層細胞分化的潛
能。這些數據有力地證明了在iCD1培養條件下，少因子（OK或OS）能夠將小鼠成纖維細胞誘導重
編程。
圖4 少因子的重編程實驗
5.4.3?采用iCD1和單因子Oct4誘導小鼠多能干細胞
MEF細胞用Oct4病毒經過兩輪感染后，在iCD1中培養，連續培養30天后，將培養物用胰酶消化
傳代種植到飼養層細胞上，用iCD1繼續培養，在傳代后的第5天左右，發現有綠色重編程克隆出
現，如圖5a所示。通過免疫熒光檢測發現這些克隆均表達多能性分子標記如Nanog，SSEA-1
和Rex1，結果如圖5b所示。
圖5c通過實時熒光定量PCR檢測多能性marker的表達狀況，結果表明這些克隆表達內源Oct4、
Nanog、Rex1、Dppa3、Dnmt3l的水平與標準的胚胎干細胞類似。
圖5d是通過實時熒光定量PCR方法分析外源基因的表達狀況。OKS感染后4天的Oct4-GFP小鼠
胚胎成纖維細胞作為陽性對照。
結果顯示挑取的這些重編程克隆，外源轉錄因子均已沉默。插入鑒定檢測結果表明 (圖5e)，挑取的
克隆不是因為病毒污染引起。
圖5f為Oct4重編程克隆細胞注射囊胚產生的嵌合體小鼠。產生的嵌合體公鼠與白色品系小鼠產下
全黑色小鼠（圖5g） ,該結果證明Oct4重編程克隆為生殖系嵌合。
上述結果證明嚴格證明Oct4重編程細胞與胚胎干細胞類似，從而證明了在iCD1培養條件下，
Oct4可將小鼠胚胎成纖維細胞完全重編程。
1.?培養基相關文獻列表：
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品牌：Delicell |
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