重組單抗生產(chǎn)的關(guān)鍵步驟：從抗體表達(dá)到純化
作者：泰克生物科技（天津）有限公司
2024-11-27T00:00
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<p><span style="font-size: 16px;">重組單克隆抗體（recombinant monoclonal antibodies, rMAbs）是利用分子生物學(xué)技術(shù)從單個(gè)B細(xì)胞中克隆并重組而成的抗體。這些抗體因其特異性、高親和力和一致性，成為了生物醫(yī)學(xué)研究和臨床應(yīng)用中的重要工具。重組單克隆抗體的產(chǎn)生始于20世紀(jì)70年代，隨著單克隆抗體技術(shù)的突破，研究人員能夠從小鼠或其他動物體內(nèi)產(chǎn)生特定的抗體，并通過雜交瘤技術(shù)實(shí)現(xiàn)大規(guī)模生產(chǎn)。</span></p>
<p><span style="font-size: 16px;">傳統(tǒng)的單克隆抗體生產(chǎn)依賴于動物免疫和細(xì)胞融合，然而，該過程面臨許多挑戰(zhàn)，如免疫原性、生產(chǎn)效率和抗體的特性等。重組技術(shù)的出現(xiàn)使得抗體的生產(chǎn)過程更加可控，能夠通過基因工程手段優(yōu)化抗體的結(jié)構(gòu)和功能。</span></p>
<p><span style="font-size: 16px;">重組單克隆抗體的應(yīng)用范圍廣泛，與傳統(tǒng)單克隆抗體相比，重組單克隆抗體不僅具有更高的純度和一致性，還能夠通過工程化改造改善其藥代動力學(xué)特性和降低免疫原性。</span></p>
<p><span style="font-size: 16px;">隨著基因組學(xué)和蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù)的發(fā)展，重組單克隆抗體的生產(chǎn)方法不斷優(yōu)化，推動了生物制藥行業(yè)的快速發(fā)展。它們的成功應(yīng)用不僅提高了治療效果，也為精準(zhǔn)醫(yī)療的實(shí)現(xiàn)奠定了基礎(chǔ)。</span></p>
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<p><span style="font-size: 16px;">重組單抗生產(chǎn)流程:</span></p>
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<p><span style="font-size: 16px;">1. 抗體基因克隆：抗體基因的選擇與克隆是重組單抗生產(chǎn)的第一步。研究人員通過PCR擴(kuò)增目標(biāo)抗體的重鏈和輕鏈基因，并將其克隆入合適的表達(dá)載體中，以便后續(xù)轉(zhuǎn)染。</span></p>
<p><span style="font-size: 16px;">2. 抗體表達(dá)：抗體表達(dá)是重組單抗生產(chǎn)中至關(guān)重要的步驟。常用的表達(dá)系統(tǒng)包括哺乳動物細(xì)胞（如HEK293和CHO細(xì)胞）、酵母和大腸桿菌等。選擇合適的表達(dá)系統(tǒng)可以提高抗體的產(chǎn)量和功能特性。哺乳動物細(xì)胞系統(tǒng)通常用于表達(dá)復(fù)雜的糖基化修飾，從而獲得具有生物活性的重組單抗。</span></p>
<p><span style="font-size: 16px;">3. 抗體純化：在抗體表達(dá)完成后，抗體需要通過純化步驟去除細(xì)胞殘留物和其他雜質(zhì)。常用的抗體純化方法包括親和層析、離子交換層析和凝膠過濾等。其中，Protein A親和層析是一種廣泛應(yīng)用于抗體純化的技術(shù)，因其高特異性和效率而受到青睞。通過結(jié)合不同的純化策略，可以提高重組單抗的純度和回收率。</span></p>
<p><span style="font-size: 16px;">4. 抗體特性分析：純化后的重組單抗需要進(jìn)行一系列的表征分析，包括濃度測定、活性測試和結(jié)構(gòu)鑒定。使用ELISA、Western blot和生物物理學(xué)方法（如圓二色譜）等技術(shù)來確認(rèn)抗體的功能和質(zhì)量。</span></p>
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<p><span style="font-size: 16px;">關(guān)鍵技術(shù)與挑戰(zhàn)</span></p>
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<p><span style="font-size: 16px;">在重組單抗生產(chǎn)中，抗體表達(dá)和抗體純化面臨諸多挑戰(zhàn)。抗體表達(dá)的關(guān)鍵在于優(yōu)化轉(zhuǎn)染條件、表達(dá)時(shí)間和溫度等，以實(shí)現(xiàn)高效的蛋白質(zhì)生產(chǎn)。此外，抗體純化的復(fù)雜性也使得研究人員需要根據(jù)抗體的特性選擇合適的純化方法，以達(dá)到高純度和高活性。</span></p>
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<p><span style="font-size: 16px;">重組單抗的生產(chǎn)是一個(gè)復(fù)雜而細(xì)致的過程，涵蓋了抗體基因克隆、抗體表達(dá)和抗體純化等多個(gè)關(guān)鍵步驟。隨著技術(shù)的不斷進(jìn)步，重組單抗的生產(chǎn)效率和產(chǎn)品質(zhì)量將進(jìn)一步提升，這將為生物制藥領(lǐng)域的創(chuàng)新和發(fā)展提供更多的可能性。</span></p>
<p><span style="font-size: 16px;">泰克生物專注于提供高效的<a href="https://www.tekbiotech.com/service/recombinant-antibody-expression-service.html" target="_blank" rel="noopener">重組抗體表達(dá)服務(wù)</a>，涵蓋從抗體基因克隆到蛋白質(zhì)表達(dá)的完整流程。我們的專業(yè)團(tuán)隊(duì)利用先進(jìn)的表達(dá)系統(tǒng)，如CHO細(xì)胞、HEK293細(xì)胞和酵母等，確保抗體具有最佳的活性和純度。我們還提供定制化的實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)，滿足不同客戶的具體需求。同時(shí)，通過嚴(yán)格的質(zhì)量控制和性能驗(yàn)證，泰克生物致力于為客戶提供高質(zhì)量的重組抗體，助力其科研和應(yīng)用開發(fā)。</span></p>
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<p><span style="font-size: 16px;"><strong>參考文獻(xiàn)</strong></span></p>
<p><span style="font-size: 16px;">1. Koller, C. F., & Kiener, P. A. (2018). Production of recombinant monoclonal antibodies. Methods in Molecular Biology, 1858, 9-20.</span></p>
<p><span style="font-size: 16px;">2. Ghosh, S., & Mandal, C. (2020). Antibody expression and purification. Current Protocols in Protein Science, 101(1), e115.</span></p>
<p><span style="font-size: 16px;">3. Schmidt, J. (2015). Strategies for the purification of recombinant antibodies. Journal of Chromatography B, 1000, 13-26.</span></p>
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