Amplite試劑盒（AAT Bioquest開發(fā)）是一系列基于熒光法或比色法的檢測試劑盒，適用于多種生物分子和生化反應(yīng)的定量分析。
一、Amplite™ 試劑盒的核心優(yōu)勢
高靈敏度與寬動態(tài)范圍
熒光法檢測限低至 nM~pM級（如ATP檢測靈敏度達0.1 nM），適合微量樣本（如原代細胞、微量體液）。
比色法線性范圍寬，適用于高濃度樣本（如培養(yǎng)基中的葡萄糖）。
操作簡便
•“Mix-and-Read” 設(shè)計：無需復(fù)雜步驟，多數(shù)試劑盒僅需一步孵育（10~30分鐘）。
• 兼容高通量篩選（HTS），適合96/384孔板自動化檢測。
優(yōu)異的抗干擾能力
• 專利熒光染料（如 Resorufin、DDAO）可減少樣本自發(fā)熒光干擾，提高信噪比。
• 部分試劑盒含內(nèi)參校正（如雙波長檢測），適用于復(fù)雜樣本（血清、組織勻漿）。
靈活適配性
• 提供熒光（Ex/Em 可調(diào)）和 比色（可見光檢測）雙平臺選擇，匹配不同實驗室設(shè)備。
• 與哺乳動物細胞、細菌、植物樣本兼容，且無需毒性溶劑（如DMSO）。
穩(wěn)定性強
• 試劑預(yù)混優(yōu)化，常溫運輸，4℃保存期長達6個月。
二、Amplite™ 試劑盒的主要應(yīng)用范圍
1. 氧化應(yīng)激與抗氧化研究
檢測目標：H?O?、超氧陰離子（O??）、總ROS、抗氧化劑（如GSH）。
應(yīng)用場景：
• 神經(jīng)退行性疾病（如阿爾茨海默癥）中的氧化損傷機制。
• 藥物/天然產(chǎn)物的抗氧化能力評價（如篩選抗衰老化合物）。
2. 能量代謝監(jiān)測
檢測目標：ATP、葡萄糖、乳酸、NAD+/NADH。
應(yīng)用場景：
• 腫瘤細胞糖酵解（Warburg效應(yīng)）研究。
• 線粒體功能異常相關(guān)疾?。ㄈ缣悄虿?、代謝綜合征）。
3. 細胞功能分析
檢測目標：細胞活力、凋亡、增殖（如LDH、蛋白酶活性）。
應(yīng)用場景：
• 抗癌藥物毒性篩選（結(jié)合IC50計算）。
• 免疫細胞激活狀態(tài)評估（如T細胞耗竭模型）。
4. 酶學(xué)與信號通路研究
檢測目標：激酶、磷酸酶、蛋白酶（如Caspase-3）、乙酰膽堿酯酶。
應(yīng)用場景：
• 激酶抑制劑開發(fā)（如EGFR、MAPK通路藥物篩選）。
• 神經(jīng)遞質(zhì)代謝調(diào)控（如乙酰膽堿降解速率檢測）。
5. 微生物與感染研究
檢測目標：細菌生物膜、β-內(nèi)酰胺酶活性、硝酸還原酶。
應(yīng)用場景：
• 抗生素耐藥性機制研究。
• 益生菌代謝活性分析。
三、常見類型以及應(yīng)用場景
1. 活性氧（ROS）與氧化應(yīng)激檢測
適用試劑盒
Amplite™ Fluorimetric Hydrogen Peroxide (H?O?) Assay Kit（熒光法檢測過氧化氫）
Amplite™ Colorimetric Total ROS Assay Kit（比色法檢測總活性氧）
應(yīng)用
• 氧化應(yīng)激研究（如細胞凋亡、炎癥）
• 抗氧化劑活性評價（如藥物篩選）
2. 葡萄糖代謝檢測
適用試劑盒
Amplite™ Fluorimetric Glucose Assay Kit（熒光法，高靈敏度）
Amplite™ Colorimetric Glucose Assay Kit（比色法，適用于常規(guī)檢測）
應(yīng)用
• 細胞/培養(yǎng)基中葡萄糖消耗監(jiān)測
• 糖尿病研究或糖代謝相關(guān)酶活性分析
3. 細胞活力與增殖檢測
適用試劑盒
Amplite™ Fluorimetric ATP Assay Kit（通過ATP含量間接反映細胞活力）
Amplite™ Cell Viability Kits（基于熒光信號）
應(yīng)用
• 藥物毒性測試
• 腫瘤細胞增殖研究
4. 酶活性檢測適用試劑盒
Amplite™ Fluorimetric Protease Assay Kit（蛋白酶活性）
Amplite™ Phosphatase/Alkaline Phosphatase (ALP) Assay Kits（磷酸酶/ALP活性）
應(yīng)用
• 酶抑制劑篩選（如激酶、水解酶）
• 信號通路研究（如磷酸化/去磷酸化）
圖示
圖為使用NOVOstar酶標儀（BMG Labtech），在具有Amplite 熒光馬來酰亞胺定量測定試劑盒的96孔板（黑色）中測量N-乙基馬來酰亞胺劑量響應(yīng)。