核酸檢測(cè)其實(shí)是檢測(cè)受測(cè)者體內(nèi)是否有新冠病毒的核酸（RNA）。每種病毒的核酸內(nèi)部都含有核糖核苷酸，不同的病毒所含的核糖核苷酸數(shù)量和排列順序不同，使得每種病毒都具有特異性。新冠病毒的核酸也是獨(dú)特的，核酸檢測(cè)就是對(duì)新冠病毒的核酸進(jìn)行特異性檢測(cè)。

01

新冠病毒核酸檢測(cè)一般流程

1.由醫(yī)護(hù)人員穿戴防護(hù)服，收集位于病人鼻咽部的液體。

2.在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)對(duì)可能存在的病毒樣液進(jìn)行滅活處理，并提取樣本的核酸（這里面病毒只占很小一部分）。

3.對(duì)該樣本核酸進(jìn)行PCR技術(shù)擴(kuò)增。

4.將可與病毒信息匹配的熒光染料或熒光探針放入其中。

5.通過熒光強(qiáng)度，再結(jié)合對(duì)照組情況，綜合判斷是否存在新冠病毒。

02

前提：確定新冠病毒特異性特征

專業(yè)人員將該病毒提取出來后對(duì)病毒RNA進(jìn)行測(cè)序，在該病毒身上尋找可以用來鑒別其特異性的片段。

03

準(zhǔn)備工作：采集受測(cè)者樣本

在進(jìn)行核酸檢測(cè)之前，需要采集受測(cè)者的痰液、咽拭子、肺泡灌洗液、血液等樣本，對(duì)這些樣本進(jìn)行檢測(cè)，就可以發(fā)現(xiàn)受測(cè)者的呼吸道感染了什么病菌。新冠病毒核酸檢測(cè)常用的是咽拭子樣本檢測(cè)，將樣本裂解提純，從中提取出可能存在的新冠病毒核酸，檢測(cè)的準(zhǔn)備工作就做好了。

04

關(guān)鍵技術(shù)：熒光定量RT-PCR

新冠病毒直徑只有60-140納米，一般細(xì)胞的直徑在10-20微米，而頭發(fā)絲的直徑在60-90微米。如果將細(xì)胞比作可以容納萬人的足球場(chǎng)，而病毒則好比里面的某個(gè)小座位一般不起眼。要想在如此小的尺度上分離出病毒，首先就是非常困難的事情，更別提如何去識(shí)別新冠病毒與其他病毒的差別。目前人們所使用的新冠病毒核酸檢測(cè)技術(shù)，主要是一種叫做實(shí)時(shí)熒光 RT-PCR 的技術(shù)。

PCR技術(shù)：聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（PCR）是一種用于放大擴(kuò)增特定的DN**段的分子生物學(xué)技術(shù)，它可看作是生物體外的特殊DNA復(fù)制，PCR的最大特點(diǎn)是能將微量的DNA大幅增加。因此，無論是化石中的古生物、歷史人物的殘骸，還是幾十年前兇殺案中兇手所遺留的毛發(fā)、皮膚或血液，只要能分離出一丁點(diǎn)的DNA，就能用PCR加以放大，進(jìn)行比對(duì)。同理，痕量的病毒感染，其核酸也可以被捕捉到。該技術(shù)由1983年美國Mullis首先提出設(shè)想，1985年由其發(fā)明了聚合酶鏈反應(yīng)，即簡(jiǎn)易DNA擴(kuò)增法，意味著PCR技術(shù)的真正誕生。

實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)：實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)是PCR技術(shù)的拓展，所謂實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)，是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán)，利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程，最后通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。PCR擴(kuò)增時(shí)加入一對(duì)引物的同時(shí)加入一個(gè)特異性的熒光探針，該探針為一寡核苷酸，兩端分別標(biāo)記一個(gè)報(bào)告熒光基團(tuán)和一個(gè)淬滅熒光基團(tuán)。探針完整時(shí)，報(bào)告基團(tuán)發(fā)射的熒光信號(hào)被淬滅基團(tuán)吸收；PCR擴(kuò)增時(shí)，Taq酶的5'－3'外切酶活性將探針酶切降解，使報(bào)告熒光基團(tuán)和淬滅熒光基團(tuán)分離，從而熒光監(jiān)測(cè)系統(tǒng)可接收到熒光信號(hào)，即每擴(kuò)增一條DNA鏈，就有一個(gè)熒光分子形成，實(shí)現(xiàn)了熒光信號(hào)的累積與PCR產(chǎn)物形成完全同步。

熒光定量RT-PCR技術(shù)是熒光定量PCR技術(shù)與RT-PCR技術(shù)的結(jié)合。

在檢測(cè)過程中，先采用RT-PCR技術(shù)將新冠病毒的核酸（RNA）逆轉(zhuǎn)錄為對(duì)應(yīng)的脫氧核糖核酸（DNA）；再采用熒光定量PCR技術(shù)，將得到的DNA進(jìn)行大量復(fù)制，同時(shí)，使用特異性探針對(duì)復(fù)制得到的DNA進(jìn)行檢測(cè)，打上標(biāo)記。如果存在新冠病毒核酸，儀器就可以檢測(cè)到熒光信號(hào)，而且，隨著DNA的不斷復(fù)制，熒光信號(hào)不斷增強(qiáng)，這樣就間接檢測(cè)到了新冠病毒的存在。