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一、客戶提供信息:

◆ 客戶具體需要的服務項目

◆ 所要表達的外源基因的名稱，序列，客戶如有現成的DNA模板可提供并提供電泳圖片，圖譜等相關信息

◆ 所要選擇的慢病毒載體（我們現在可供選擇具有GFP，lacZ報告基因及不帶報告基因的慢病毒載體）

◆ 所需要表達的外源基因是否要帶有融合標簽，如果需要請選擇需要的標簽，并選擇加入標簽的位置

◆ 是否需要檢測外源基因的表達，如需要請提供相應的抗體

◆ 所需要的病毒滴度

◆ 如需要篩選穩定細胞株的客戶需選擇符合自己需要的細胞株（可以自行提供）

1.1慢病毒包裝服務特點：

1.1.1直接包裝成為假病毒顆粒，對分裂和非分裂細胞均有感染作用，適合RNAi研究和體內實驗中難于轉染的細胞 (比如神經元細胞、干細胞或其它原代細胞)。

1.1.2可以通過簡單方式，在短時間內獲得穩定表達特定基因的多種細胞株。

1.1.3可用于基因敲除、基因治療和轉基因動物研究。

1.1.4無需任何轉染試劑，操作簡便。

1.1.5可以根據客戶需要制備多種標記。

1.2原理：

慢病毒（Lentivirus）是逆轉錄病毒的一種。構建的siRNA / miRNA慢病毒載體，與化學合成的siRNA和基于瞬時表達載體構建的普通siRNA載體相比，一方面可以擴增替代瞬時表達載體使用，另一方面，Lentivirus-siRNA克隆經過慢病毒包裝系統包裝后，可用于感染依靠傳統轉染試劑難于轉染的細胞系如原代細胞、懸浮細胞和處于非分裂狀態的細胞，并且在感染后可以整合到受感染細胞的基因組，進行長時間的穩定表達。

1.3慢病毒包裝簡要流程：

1.3.1含有目的基因的慢病毒RNAi干擾載體的構建和質粒純化提取。

1.3.2慢病毒載體，包裝系統共轉染病毒包裝細胞。

1.3.3培養48hrs - 72hrs左右，收集含有病毒的上清培養液。

1.3.4病毒的純化和濃縮。

1.3.5分裝、- 80 ^oC保存。

1.3.6滴度測定。

1.4本公司提供的最終產品包括：

1.4.1重組后的慢病毒載體質粒以及測序圖譜。

1.4.2產品無菌檢測結果。

1.4.3慢病毒儲液及相應的病毒滴度。

1.5我們保證：

1.5.1 制備的病毒顆粒攜帶片段的正確性

1.5.2 病毒顆粒的總數和病毒滴度：如無特殊要求我們提供1mL滴度為1×10⁷ - 1×10⁸ vp/ mL的病毒儲液。