CRISPR Indel
產品名稱： CRISPR Indel
英文名稱： CRISPR Indel
產品編號： IC1
產品價格： 詢價
產品產地： null
品牌商標： null
更新時間： 2025-08-15T14:35:05
使用范圍： null
啟東芳景生物科技有限公司
- 聯系人 : 樊女士
- 地址 : 啟東市經濟開發區林洋路500號
- 郵編 :
- 所在區域 : 江蘇省
- 電話 : 181****0069 點擊查看
- 傳真 : 點擊查看
- 郵箱 : fanjinhua@fungene.tech
CRISPR Indel
通過CRISPR非同源修復產生基因組序列的Indel（small insertion and deletion，即少量堿基的插入和缺失），實現了基因編碼區域的移碼突變，從而造成基因功能的破壞。
技術優勢：
?適用性廣泛：小范圍基因編輯，避免敲除對附近相關基因造成影響
?敲除效率高：針對較難敲除的基因或基因組區域有更好的效果
局限性與解決方案：
?局限性：可能產生新的未知功能蛋白，對基因功能研究造成表型干擾
?解決方案：芳景生物可根據客戶需求，獲取多個移碼突變基因型，以減少可能得新蛋白對研究的干擾。
| CRISPR indel(one target) | ||
| 實驗步驟 | 內容 | 周期(周) |
| Target測序 | 1.方法：PCR測序 2.目的：確定注射果蠅品系的靶序列，確保gRNA序列正確并進行有效切割 |
1 |
| gRNA和cas9-mRNA合成制備 | 1.gRNA設計：一個靶位點設計兩個gRNA 2.gRNA合成：T7體外轉錄合成 3.cas9-mRNA合成：優化的cas9-DNA質粒為模板，體外轉錄合成cas9-mRNA |
2 |
| 顯微注射 | 1.注射品系：w1118(或客戶指定品系) 2.注射樣品：gRNA+cas9-mRNA 3.注射胚胎數量：300-400個 |
2 |
| 雜交鑒定和構建穩定品系 | 1.P0果蠅與平衡子雜交，并進行indel測序鑒定 2.陽性P0的子代F1果蠅與平衡子雜交，并進行indel測序鑒定 3.陽性F1的子代F2果蠅與平衡子雜交，并進行indel測序鑒定 4.陽性F2的子代F3果蠅自交構建穩定品系 5.F3的子代F4果蠅自交構建純合品系，并進行indel測序鑒定 |
8~10 |
| 合計 | 13~15 |