CRISPR KO
產品名稱： CRISPR KO
英文名稱： CRISPR KO
產品編號： IC2
產品價格： 詢價
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更新時間： 2025-08-15T14:37:30
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CRISPR KO
利用CRISPR基因編輯技術對基因組中一定距離的兩個靶點進行切割，并通過非同源末端連接(NHEJ)修復機制實現這兩個靶點間序列的敲除(Knock out, KO)，導致該序列功能喪失。
技術優勢：
?提供高效的設計方案，最小化對鄰近基因的影響，確保敲除的特異性。
?高效率敲除，并擁有成功敲除100kb以上基因組序列的經驗。
| CRISPR KO(two targets) | ||
| 實驗步驟 | 內容 | 周期(周) |
| target測序 | 1.方法：PCR測序 2.目的：確定注射果蠅品系的靶序列，確保gRNA序列正確并進行有效切割 |
1 |
| gRNA和cas9-mRNA合成制備 | 1.gRNA設計：兩個靶位點各設計兩個gRNA 2.gRNA合成：T7體外轉錄合成 3.cas9-mRNA合成：優化的cas9-DNA質粒為模板，體外轉錄合成cas9-mRNA |
2 |
| 顯微注射 | 1.注射品系：w1118(或客戶指定品系) 2.注射樣品：gRNA+cas9-mRNA 3.注射胚胎數量：300-400個 |
2 |
| 雜交鑒定和構建穩定品系 | 1.P0果蠅與平衡子雜交，并進行KO PCR鑒定 2.陽性P0的子代F1果蠅與平衡子雜交，并進行KO PCR和測序鑒定 3.陽性F1的子代F2果蠅與平衡子雜交，并進行KO PCR鑒定 4.陽性F2的子代F3果蠅自交構建穩定/純合品系 |
8~10 |
| 合計 | 13~15 |