抗體酵母展示服務
產品名稱： 抗體酵母展示服務
英文名稱： 抗體酵母展示服務
產品編號： 抗體酵母展示服務
產品價格： 詢價
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品牌商標： null
更新時間： 2024-06-10T15:23:59
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泰克生物致力于為客戶提供高親和力、高特異性的抗體藥物前期發現技術服務，為客戶的后續的CAR-T/CAR-NK先導序列設計、抗體人源化、藥物靶點抗體開發、抗體偶聯藥物（ADC）開發、雙特異性抗體開發以及高效阻斷型中和抗體開發等下游研發工作提供有力支持。泰克生物在藥物抗體發現方面擁有10年的項目開發經驗和心得，能夠為客戶提供高質量的針對包括但不限于蛋白、多肽、小分子、病毒、膜蛋白以及mRNA等靶點的駝源VHH發現服務以及不同物種（兔源、鼠源、羊源和駝源等）scFv發現服務。
酵母抗體展示技術（Yeast Display Technology）是指用抗體序列可變區與凝集素Aga2p融合表達，Aga2p蛋白亞基通過兩個二硫鍵與固定在酵母細胞壁上的Aga1p 蛋白亞基結合，結合流式分選技術，將靶向抗原的特異性抗體篩選出來。基于酵母體展示技術（Yeast Technology），泰克生物能夠為客戶提供高質量的包括但不限于VHH、scFv等單鏈抗體酵母展示服務，且酵母文庫庫容可達10^8，文庫多樣性、插入率、陽性率均可達90%以上，滿足各類客戶對于抗體酵母展示文庫的質量要求。同時，泰克生物還能提供抗體酵母展示配套的下游抗體體外驗證（包括但不限于親和力驗證、抗體阻斷驗證、交叉反應驗證等多種下游驗證實驗）、抗體人源化、抗體親和力成熟、CAR-T/CAR-NK先導序列設計及細胞殺傷驗證等一站式技術服務，客戶只需要提供具體的實驗需求和靶點信息，泰克生物的科學家均能夠根據客戶的需求進行合理的方案設計和個性化定制，為客戶的科研項目及藥物抗體開發助力。
█ 酵母展示抗體文庫構建服務
泰克生物擁有2個動物免疫基地，保證客戶項目中免疫的動物背景來源清晰且健康。VHH分子量大小約15kDa，是駝源動物特有的一種抗體重鏈可變區，免疫原性低且穩定性高，易獲得高親和力、高特異性及有效阻斷性的中和抗體，在藥物靶點抗體開發、CAR-T/CAR-NK治療（目前被廣泛應用于CAR-T/CAR-NK治療性抗體，主要以駝源VHH抗體（又被稱為納米抗體）為主）等方面具有天然的優勢。酵母展示文庫相對噬菌體展示文庫技術而言，前者在微量抗體表達后抗體活性層面相較于后者要高，得益此基礎，在流式篩選時就能區分抗體的親和力高低。
█ 服務內容和周期
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步驟 |
服務內容 |
QC標準 |
周期 |
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Step1：抗原準備 |
*抗原類型： (1) 重組蛋白制備 (2) 小分子（改造）+偶聯 (3) 多肽合成+偶聯 (4) 客戶提供滅活病毒 (5) 客戶提供封裝好的mRNA |
抗原QC標準： 重組蛋白3-3.5mg(純度>85%)； 小分子純度>90%； 多肽純度>90%；
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4-6周 |
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Step2:動物免疫 |
(1) 動物免疫4次，加強免疫一針，共計免疫5針； (2) 免疫前采集陰性血清，第4針采血進行ELISA檢測血清效價； (3) 若第4針血清抗體效價滿足要求，則采血前7天再次加強免疫1針，如不滿足要求，則繼續常規免疫； (4) 效價合格，采血分離單核細胞； |
動物：背景清晰（年齡，性別，防疫情況）； 免疫：蛋白/病毒抗原效價>10^5；多肽/小分子抗原效價>10^4； |
10周 |
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Step3:模板cDNA制備 |
(1) PBMC總RNA提取（RNA提取試劑盒） (2) 高保真RT-PCR制備cDNA（反轉錄試劑盒） |
cDNA：膠圖分布均勻； |
1 天 |
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Step4:抗體酵母展示文庫構建 |
(1) 以文庫cDNA為模板，兩輪PCR法擴增VHH基因 (2) 酵母展示載體構建與轉化： VHH基因拼接酵母展示載體，電擊轉化酵母菌，構建抗體庫 (3) 鑒定：隨機挑選48個克隆，PCR鑒定陽性率;測序計算插入正確率和文庫多樣性 |
文庫陽性率：>90%； 文庫插入性率：>90%； 文庫多樣性>90% 庫容：10^7-10^8 |
3-4周 |
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Step5:文庫篩選 |
(1) 默認3輪篩選：熒光標記蛋白FACS篩選； (2) 第三輪產物進行NGS測序；同時挑單克隆誘導表達+ELISA檢測陽性克隆； (3) 挑取全部陽性克隆進行基因測序； |
陽性標準：FACS和ELISA雙陽性菌株； VHH篩選標準：CDR氨基酸序列不同 |
3-4周 |
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Step6:抗體驗證 |
(1) 抗體序列構建合適的表達載體進行表達+親和純化+抗體定量； (2) ELISA驗證抗體與抗原結合（交付EC50數據）; (3) BLI法驗證抗體親和力； (4) 細胞功能驗證：流式阻斷驗證； |
重組抗體1mg，純度90%； 快速親和力測定結果； 阻斷驗證結果； |
4-6周 |
█ 服務優勢
-- 多種駝源免疫可供選擇
-- 擁有免疫基地：動物資源充足，包括但不限于駝源、鼠源、兔源以及羊源等
-- 多種抗體庫酵母展示可選：VHH抗體庫展示、scFv抗體庫展示等
-- 多種靶點抗體發現服務可選：蛋白、多肽、小分子、病毒、膜蛋白、mRNA等
-- 技術平臺成熟：庫容可達10^7-10^8，插入率均滿足>95%，篩選獲得的抗體親和力普遍處于nM-pM級別
-- 高標準交付：效價保證、文庫質量保證、高親和力和高特異性抗體保證，為客戶的下游實驗提供有力支持
-- 實驗記錄可追溯：QC質控標準（免疫效價、PBMC質控、文庫質控及篩選驗證質控），中英文實驗報告，原始實驗記錄
-- 可提供一系列配套的下游藥物抗體開發服務，抗體體外表達驗證、抗體人源化、抗體親和力成熟、雙特異性抗體開發、CRA-T先導序列分子設計、抗體偶聯藥物（ADC）開發等
-- 一對一個性化方案定制，滿足各類客戶的科研項目需求