急性呼吸窘迫綜合征(ARDS)小鼠模型
產品名稱： 急性呼吸窘迫綜合征(ARDS)小鼠模型
英文名稱： Mouse Model for Acute Respiratory Distress Syndrome (ARDS)
產品編號： DSI626Mu01
產品價格： 1
產品產地： null
品牌商標： null
更新時間： null
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來源
LPS致呼吸窘迫綜合征
模式動物品系
SPF級C57bl/6小鼠，雄性，周齡為8w-10w，體重為30g-35g。
實驗分組
實驗分六組：正常對照組、模型組、陽性藥組、受試藥組三個劑量組。
實驗周期
1 week
建模方法
模型建立：經腹腔麻醉小鼠，采用暴露式氣管切開滴注的方法，經氣管向肺內滴注LPS（給藥劑量6mg/kg）而后將小鼠直立，垂直旋轉小鼠，使藥物在肺內均勻分布，從而建立內毒素性急性肺損傷小鼠模型。或者LPS經尾靜脈或者腹腔給藥，從而建立全身性炎性反應導致的ARDS模型。
在氣道滴注LPS 6小時、12小時、24小時及48小時后，各取3只小鼠處死并收集支氣管肺泡灌洗液（BALF）及肺組織。
樣本收集：
支氣管肺泡灌洗液（BALF）抽取方法：小鼠取血后，開胸，分離縱膈，注射器抽取3ml生理鹽水從氣管插管推入肺中，每次反復灌洗3次后抽出灌洗液，肺泡灌洗液以4℃ 3000r/min離心15min，取上清。
小鼠肺組織收集：肺組織的獲取及處理:經腹腔內注射麻醉小鼠，用肝素化的生理鹽水1ml經右心室心腔沖洗做抗凝處理，即刻從胸腔中取不同部分肺組織標本。
應用
疾病模型
模型評價
Diff-Quik 染色和細胞計數：
獲得BALF進行Diff-Quik染色后，顯微鏡下觀察計數計數中性粒細胞、巨噬細胞和淋巴細胞。
肺的濕/干重比：
肺的濕/干重比是反應肺水腫的直接指標，也是反應肺損傷嚴重程度的敏感指標。每組處死動物、剪斷氣管后取全肺，稱濕重，然后將肺置于65℃恒溫箱中干燥，24h 后取出稱干重，計算肺濕/干重比值。
伊文氏藍測定肺通透性：
在實驗結束前30min靜脈注射伊文氏藍（EBD），30mg/kg，實驗結束后，開胸剪開右房，沖洗肺循環，完整取出雙肺，剪去氣管，清洗擦干肺組織，稱重后勻漿，以每100mg肺組織1ml的甲酰胺浸泡肺勻漿，37度下孵育24小時，5000r/min離心，取上清測EBD濃度。
組織病理學
肺損傷后的組織病理觀察（HE染色） ：
取右肺4%多聚甲醛固定，然后將肺組織常規脫水，石蠟包埋，切片（厚度為5μm），HE染色。評分方法：取6個視野進行出血及水腫評分。
標志因子水平
使用ELISA試劑盒檢測肺泡灌洗液（BALF）中TNF-a、IL-6和IL-1β等細胞因子的含量。
統計學分析
應用SPSS軟件進行統計分析，計量資料以均數±標準差（x ±ｓ）表示，采用ｔ檢驗，組間比較采用單因素方差分析，P<0.05表示有顯