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我公司提供多種sgRNA活性檢測方法，包括SSA luciferase報告系統、Surveyor法、Q-PCR、突變點基因測序等

• SSA檢測：根據客戶要求檢測sgRNA的活性及敲除效率，客戶也可以選購我公司Precut pSG-target Cloning kit自行構建報告載體用于檢測，我公司提供陽性及陰性sgRNA及其SSA report target質粒。

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• 檢測原理：SSA報告質粒(pSG-target)中luciferase基因被終止密碼子提前終止，這種截短的luciferase沒有活性。為檢測sgRNA的剪切活性，將Cas9/sgRNA的靶點序列插入到終止密碼子之后。在Cas9和sgRNA的作用下，靶點位置的序列被有效剪切形成DSB，細胞通過同源重組重新形成有活性的luciferase（Figure 1），通過檢測luciferase的活性升高就可以反應Cas9/sgRNA的剪切活性（Figure 2）

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Figure 1. Restore disrupted luciferase function via sgRNA-mediated homologous recombination

Figure 2.Increased FL/RL ratio in Cas9/sgRNA transfection cells.

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Biomics CRISPR相關服務鏈接如下：