APP/PS1雙轉基因小鼠模型AD阿爾茲海默癥老年癡呆癥模型銷售
產品名稱: APP/PS1雙轉基因小鼠模型AD阿爾茲海默癥老年癡呆癥模型銷售
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本單位提供的APP/PS1轉基因小鼠均為SPF級別,均提供合格證書及檢測
APP/PS1雙轉基因敲除小鼠 模型
品系描述:
APP/PS1雙轉基因敲除小鼠可表達突變的人類早老素(DeltaE9)和人鼠淀粉樣前蛋白(APPswe)融合體,這兩個基因的表達都由小鼠朊病毒蛋白啟動子啟動。人類早老素基因的DeltaE9突變是該基因的第九個外顯子缺失產生的,此突變會導致早發性老年癡呆癥。對APP/PS1雙轉基因敲除小鼠小鼠腦蛋白勻漿進行免疫檢測發現,人類早老素蛋白高水平地替代了可檢測到的小鼠內源性蛋白,并且,在腦勻漿中還檢測到了人源淀粉樣前蛋白。據研究者報道,6-7月齡的APP/PS1雙轉基因敲除小鼠腦內會形成beta淀粉狀蛋白沉淀。
應用領域
1) 老年癡呆癥的人/鼠基因同系物研究
2) 老年癡呆癥和神經退行性變化的神經生物學研究
目的對所獲的PS1/APP雙轉基因阿爾茨海默病(A lzhe im er d isease,AD)模型小鼠進行基因鑒定,進一步對其進行組織學分析,檢測老年斑(sen ile p laque,SP)的形成情況。方法設計特定的引物,PCR擴增轉入基因組DNA中的APP基因,對轉入PS1/APP的小鼠應用剛果紅染色結合免疫組化觀察Aβ沉積、小膠質細胞和星型膠質細胞的活化。結果與未轉入的陰性對照相比,在PS1/APP雙轉基因的AD小鼠皮質和海馬內可見Aβ斑塊形成,圍繞在Aβ斑塊周圍的小膠質細胞和星形膠質細胞處于活化狀態,形成典型的SP結構。結論我們獲得的PS1/APP雙轉基因小鼠能夠模擬AD患者腦內的
STRAIN NAME: C57BL/6J--KO(Apoe-KOXCMV-hApoE4)
TYPE: transfergen
BACKGROUND STRAIN: C57BL/6J
COAT COLOR: black
ORIGIN: Developed through crosses and back-crosses between CMV-ApoE4 transgenic mice and ApoE4 gene knockout mice. Systemic expression human ApoE4 gene, but no expression mice ApoE3 gene, IT is important tool to study different ApoE alleles. The human ApoE CDNA length 1.163kb. ApoE gene has three alleles, namely E2, E3 and E4, constitute the six different genotypes: three homozygous (E2/E2, E3/E3 and E4/E4) and three heterozygous (E2 / E3, E3/E4 and E2/E4). The gene frequencies is differen in differen ethnic and different regional, E2 accounted for 8%, E3 accounted for 78%, E4, 14%. using the CMV expression ApoE2, ApoE3 and ApoE4 transgenic mice is mportant models for study CHD, hyperlipidemia, cerebral infarction and chronic hepatitis and other diseases
app/ps1基因敲除小鼠構建技術服務 基因敲除小鼠模型建立技術服務 基因敲除小鼠價格優惠
基因敲除小鼠利用基因打靶技術產生轉基因動物的程序一般為:(1) 構建基因打靶載體; (2) 將基因打靶載體通過一定的方式(常用電穿孔法) 導入同源的胚胎干細胞中,使外源DNA 與胚胎干細胞基因組中相應部分發生同源重組,將打靶載體中的DNA 序列整合到內源基因組中從而得以表達; (3) 篩選發生同源重組的陽性克隆,通過顯微注射或者胚胎凝集的方法將經過遺傳修飾的ES細胞引入受體胚胎內制作嵌合體小鼠,在生物活體中研究特定基因的功能。基因敲除小鼠使得研究者們能夠觀察到某一特定基因完全失活后小鼠表型的改變,從而推斷出特定基因的作用。
基因敲除小鼠基因打靶的原則是, 外源DNA 片段含有與目的基因的某一段核酸序列相同或接近的同源序列, 同源重組就發生在這兩個序列之間。基因敲除小鼠外源DNA 序列的定位整合有兩種方式, 即插入型(又稱O 型) 和置換型(又稱8 型)。與此相對應, 打靶載體可分為兩類: 插入型載體和置換型載體。
基因敲除小鼠第一步,胚泡時期發育胚胎的分離。此胚胎來源于灰色品系的小鼠。
基因敲除小鼠第二步,從灰色小鼠胚泡中分離胚胎干細胞,在體外進行培養。
基因敲除小鼠第三步,用同源重組載體轉染胚胎干細胞,用含有新霉素和更昔韋洛的培養基篩選發生了同源重組的細胞。
基因敲除小鼠第四步,將篩選得到的胚胎干細胞植入白色小鼠的早期胚胎(胚泡時期)中。
基因敲除小鼠第五步,將上述胚胎植入假孕母鼠(白色)子宮中。
基因敲除小鼠第六步,在母鼠所產的小鼠中,有一些是正常的白色,另一些則是嵌合體灰白相間的小鼠。這些嵌合體小鼠的細胞一部分起源于白色皮毛的胚泡細胞,另一部分則起源于重組的胚胎干細胞。起源于重組胚胎干細胞的皮毛顯示出灰色斑塊,很好辨認。
基因敲除小鼠第七步,嵌合體小鼠與野生型白色小鼠進行雜交,如果嵌合體小鼠的生殖細胞恰好是起源于重組胚胎干細胞,那么其子代小鼠就都應該呈現灰色。而這些灰色小鼠的所有細胞都是雜合體。
基因敲除小鼠第八步,雜合體灰色小鼠(+/H)之間進行雜交,得到灰色和白色的子代。從灰色子代中篩選出純合小鼠(H/H),其一對同源染色體上的等位基因都失活,此純合小鼠即為 “基因敲除小鼠構建”。
我們有開發的基因敲除小鼠構建APOE(動脈硬化研究),
基因敲除小鼠PEPT(白內障研究)
Shh+/- 基因敲除小鼠構建等小鼠: Shh(Sonic hedgehog)基因在脊椎動物胚胎組織形成中起著重要的作用,包括大腦、脊椎、中軸骨骼和四肢的形成。基因缺失的胚胎早期可以觀察到中間結構如脊索和地板的形成和維持的影響,晚期可以觀察到遠肢結構的缺失以及獨眼,腹部細胞包括神經管的缺失、脊柱和許多肋骨的缺失。基因敲除小鼠Shh蛋白被證實是脊椎動物發育過程中組織形成所必須的胞外信號。
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