RT-PCR技術服務
產品名稱: RT-PCR技術服務
英文名稱: PCR
產品編號: 04
產品價格: 1800元/10樣本
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品牌商標: null
更新時間: null
使用范圍: null
蒲若生物科技有限公司
- 聯系人 :
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◇服務內容:
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1、RT-PCR獲取目的基因,并構建到目的載體上;
2、半定量RT-PCR;
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◇質量保證:
????? 我公司多年專業RT-PCR技術服務,我們保證對所售任何產品一概負責到底,每一份實驗結果都真實可靠!
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◇注意事項:
????? 本公司不接受您提供的RNA樣品,除非您有足夠的證據證明所提供的RNA沒有問題。RT-PCR過程中的所需引物,您可以委托本公司設計合成,也可以由您提供,但是引物必須是PAGE純化的高質量的干粉,一般我們不接受已溶解的引物。
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◇具體操作:
一、RT-PCR擴增目的基因:
1、提取目的細胞或組織的總RNA,并將其反轉錄成cDNA;
2、采用普通PCR擴增得到目的基因(對于片段較長或在細胞中表達量較低的基因,采用巢式PCR進行擴增);
3、將目的基因克隆到T載體上,并進行測序鑒定(如客戶需要克隆到其他載體上,需要提供載體,可直接將目的基因克隆到相應載體上);
二、半定量RT-PCR(一般用于目的基因表達改變的檢測):
1、提取目的細胞或組織的總RNA,并將其反轉錄成cDNA;
2、采用普通PCR擴增內參(b-actin或GAPDH),調整擴增循環數,使其處于對數擴增期;調整內參,使其保持一致;
3、普通PCR擴增目的基因,并通過圖像分析軟件分析目的基因與內參表達量的比例;
4、統計分析;
