iTRAQ/TMT標記定量蛋白質組學
產品名稱： iTRAQ/TMT標記定量蛋白質組學
英文名稱： iTRAQ/TMT
產品編號： 01
產品價格： 5000
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品牌商標： null
更新時間： null
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iTRAQ技術是由美國應用生物系統(tǒng)公司（Applied Biosystems Incorporation，ABI）研發(fā)的一種多肽體外標記技術。該技術利用多種同位素試劑標記蛋白多肽N末端或賴氨酸側鏈基團，經高精度質譜儀串聯(lián)分析，可同時比較多達8種樣品之間的蛋白表達量。
技術原理
iTRAQ試劑由報告基團、中性平衡基團和肽反應基團三部分組成（如圖1），其中反應基團可以同肽段N末端和賴氨酸ε氨基基團發(fā)生反應，標記生物樣品中產生的所有肽段，平衡基團（31-24Da）用來平衡分子量，保證與每一種報告基團（113-121Da）結合后總的相對分子質量都是145。在質譜分離過程中，不同樣本中同一多肽表現(xiàn)為相同的質荷比；經過二級質譜時，平衡基團發(fā)生中性丟失，而報告基團在二級質譜低質量區(qū)域產生不同報告離子，根據報告離子的信號強度值可獲得蛋白質的定量信息。
實驗流程
檢測儀器
Thermo Scientific Q Exactive
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技術特點
1.?液質聯(lián)用，分離能力強、分析范圍廣，組織或細胞中可鑒定多達6000種蛋白；
2.?可同時對2-8個樣本進行差異蛋白分析；
3.?適合廣泛樣品類型：胞漿蛋白、膜蛋白、核蛋白、胞外蛋白等；
4.?可檢測出低豐度蛋白、強堿性蛋白、小于10KD或大于200KD的蛋白、難溶性蛋白等。
樣本要求
樣本類型 | 樣本要求 |
蛋白質提取液 | 濃度達1μg/μl，總蛋白量達300μg ? |
細胞樣本 | 細胞量達107 |
組織樣本 | 動物、微生物組織濕重達10mg；植物鮮嫩組織達100mg ? |
體液樣本 | 血液體積大于500μl |
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代表性文獻
1.?Rebekka K S, et al. Rps14 haploinsufficiency causes a block in erythroid differentiation mediated by S100A8 and S100A9. Nat Med, 2016; 22: 288-297.
2.?Kim M S, et al. A draft map of the human proteome. Nature,2014;509(7502): 575-581.