DNA提取/RNA提取/基因合成
產品名稱： DNA提取/RNA提取/基因合成
英文名稱： Western Biotechnology Inc
產品編號：
產品價格： 歡迎來電詳詢023-65316016，023—65316556
產品產地： null
品牌商標： null
更新時間： 2023-11-16T15:06:26
使用范圍： null
DNA提取/RNA提取/基因合成
DNA提取
實驗介紹
從新鮮組織、血液、細胞、細菌等多種材料中提取基因組DNA，不同種類的材料中提取的基因組DNA量不同，而且差異也比較大，一般材料的基因組
DNA提取情況如下
材料種類 | 樣品要求 | 起始量 | 收量 |
血液 | 新鮮血液及抗凝劑處理的全血 | 100 μl | 1 μg左右 |
培養細胞 | 離心收集的細胞 | 1×106 | 10 μg左右 |
動物組織 | 一般材料 | 100 mg | 5~10 μg |
植物 | 一般材料 | 100 mg | 5~10 μg |
細菌 | 菌懸液或離心收集后的菌體 | 1×108 | 1~2 μg |
客戶須知
1、細菌、細胞樣品需新鮮培養；動物組織、植物組織等樣品取樣后需液氮速凍。
2、用于提取基因組DNA的血液樣品在4℃下可保存一周，-20℃下可保存1個月。
3、實驗樣品最好使用干冰運輸。
4、結果提供基因組DNA、完整實驗報告（電泳照片、OD值測定結果等）。
5、不同抗凝種類、抗凝程度、凍存時間等因素會導致血液樣品之間差異較大、產量不同和價格有所不同。
實驗周期
大約一周，根據量的多少而有所不同。
RNA提取
實驗介紹?
TRIZOL試劑中的主要成分為異硫氰酸胍和苯酚，其中異硫氰酸胍可裂解細胞，促使核蛋白體的解離，使RNA與蛋白質分離，并將RNA釋放到溶液中。當加入時，它可抽提酸性的苯酚，而酸性苯酚可促使RNA進入水相，離心后可形成水相層和有機層，這樣RNA與仍留在有機相中的蛋白質和DNA分離開。水相層（無色）主要為RNA，有機層（黃色）主要為DNA和蛋白質。
實驗步驟
在收集到生物材料之后，最好能即刻進行RNA 制備工作。若需暫時儲存，則應以液氮將生物材料急速冷凍后，儲存于-80℃冷凍柜。在制備RNA 時，將存于冷凍柜的材料取出，立即以加入液氮研磨的方式打破細胞，不可以先行解凍，以避免RNase的作用。
1. 提取組織RNA 時，每50～100mg 組織用1ml Trizol試劑對組織進行裂解；提取細胞RNA 時，先離心沉淀細胞，每5-10 ╳106 個細胞加1ml Trizol后，反復用槍吹打或劇烈振蕩以裂解細胞；
2. 將上述組織或細胞的Trizol裂解液轉入EP 管中,在室溫15~30C下放置5 分鐘；
3. 在上述EP 管中，按照每1ml TRIZOL 加0.2ml 蓋上EP管蓋子，在手中用力震蕩15 秒，在室溫下（15℃～30℃）放置2～3 分鐘后，12000g（2℃～8℃）離心15 分鐘；
4. 取上層水相置于新EP 管中,按照每1ml TRIZOL 加0.5ml 異丙醇的量加入異丙醇，在室溫下（15℃～30℃）放置10 分鐘,12000g（2℃～8℃）離心10 分鐘；
5. 棄上清，按照每1ml TRIZOL 加1ml 75%乙醇進行洗滌，渦旋混合，7500g（2℃～8℃）離心5 分鐘，棄上清；
6. 讓沉淀的RNA 在室溫下自然干燥；
7.用Rnase-free water 溶解RNA 沉淀。
基因合成
以前，實驗室通常用PCR和RT－PCR的方法來獲取某個基因片段，但是往往因為標本和模板等原因無法釣取該段基因。如今，我們采用化學合成的方法人工構建基因片段，即：全基因合成拼接技術。可以為廣大的科研朋友服務。
基因合成是指在體外合成雙鏈DNA分子的一門技術,與寡核苷酸合成有所不同，寡核苷酸是單鏈的，所能合成的最長片段僅為100nt左右，而基因合成則為雙鏈DNA分子合成，所能合成的長度范圍50bp-12 kb。可根據客戶需求，我中心可以提供全基因合成服務，速度快、周期短、價格優惠。合成的基因可以根據客戶的需求連接到不同的載體上，最終提供的產品包括菌株以及凍干的質粒和全基因完整的測序報告。
全基因合成的適用范圍：
A: 自然界中無法以常規實驗手段得到的基因
B:研究人員通過自己的意愿設計基因序列,以得到自然界中不存在的基因
C:對已知基因序列進行大量密碼子優化重排,以期達到對該基因進行高效表達或獲得新的生物特性等研究目的
服務優勢：
A:合成基因最長已達到10.5KB,已完成基因超過10000條
B:可以合成重復序列(重復次數無限制).高GC(小于80%).發夾(參照每200bp小于3個發夾為限).連續單一堿基重復(GC小于15個,AT小于20個)等富含特殊結構的基因注:特殊結構基因合成的相關數據是根據我公司曾經成功合成過的基因序列所做的總結,以作為您設計基因序列時判斷是否能順利合成作為參考,具體還需以實際基因序列來定
C:基因可以克隆到客戶提供或指定的表達載體上
D:免費提供基因結構設計.基因密碼子優化,基因克隆表達方案設計等基因合成相關咨詢服務.
全基因合成操作程序：
1、我們將對您需要合成的基因全序列進行分析，檢查基因內部是否含有重復序列，然后根據序列的具體情況設計合成方案。
2、在得到您認可后，我們將立即進行單鏈Oligo DNA 合成，DNA片段拼接等工作。然后把全長基因克隆到載體中，再通過DNA測序確認合成基因的正確性。
3、測序結果如果發現有錯誤位點，我們會采取相應的技術手段進行修復校對，保證整個序列的正確性。
結果提供：
A: 基因合成報告單一份
B: 含目的基因的質粒(不少于1ug)一份
C: 含目的基因的菌株一份
D：基因合成的測序圖譜一份
威斯騰實驗服務流程
