慢病毒,腺病毒,以及RNAi/基因過表達專業(yè)服務(wù)
產(chǎn)品名稱: 慢病毒,腺病毒,以及RNAi/基因過表達專業(yè)服務(wù)
英文名稱: western biotechnology
產(chǎn)品編號:
產(chǎn)品價格: 詳詢023-65316016,023—65316556
產(chǎn)品產(chǎn)地: null
品牌商標: null
更新時間: 2023-07-31T09:56:51
使用范圍: null
?
???? 我中心可以為廣大科研朋友提供慢病毒載體構(gòu)建,腺病毒載體的構(gòu)建,腺病毒的擴增,包裝,純化。以及慢病毒的包裝和純化。基因的過表達,以及RNAI相關(guān)的研究。
?????威斯騰生物技術(shù)服務(wù)中心是一家從事生命科學(xué)研究、產(chǎn)品開發(fā)和實驗技術(shù)服務(wù)的專業(yè)機構(gòu),目前主要從事基因診斷試劑的研發(fā)以及分子生物學(xué)、細胞生物學(xué)和免疫學(xué)相關(guān)領(lǐng)域的技術(shù)服務(wù)。我們的宗旨是:加強學(xué)術(shù)交流,推動科研發(fā)展,科學(xué),嚴謹,求實,專業(yè)。?
1、慢病毒的簡介:
Lentivirus是逆轉(zhuǎn)錄病毒的一種,具有逆轉(zhuǎn)錄病毒的基本結(jié)構(gòu)和特性;能整合入宿主細胞基因組,長期表達,可用于轉(zhuǎn)基因動物制備;但也有不同于逆轉(zhuǎn)錄病毒的組分和特性;比逆轉(zhuǎn)錄病毒具有更高的滴度,不僅可以感染分裂細胞,更重要的是還能感染非分裂的細胞。利用Lentivirus構(gòu)建的shRNA表達載體,與化學(xué)合成的siRNA和基于瞬時表達載體構(gòu)建的shRNA相比,一方面可以替代后者,另一方面,Lentivirus-shRNA載體經(jīng)包裝系統(tǒng)包裝后,可用于感染依靠傳統(tǒng)轉(zhuǎn)染試劑難于轉(zhuǎn)染的細胞(如原代細胞、懸浮細胞等),并且在感染后可以整合到受感細胞的基因組,進行長時間的穩(wěn)定表達,是制備穩(wěn)定表達shRNA細胞株和進行體內(nèi)實驗(in?vivo)的最有效手段。目前我們能夠為客戶提供從載體構(gòu)建到慢病毒包裝純化和檢測的一站式服務(wù);同時公司還在高效慢病毒生產(chǎn)技術(shù)的基礎(chǔ)上建立并完善了慢病毒載體制備轉(zhuǎn)基因動物的實驗技術(shù)。
2、慢病毒載體構(gòu)建包裝實驗流程如下:
1.?根據(jù)目的基因相關(guān)信息(序列,基因序列號等),構(gòu)建含有外源基因或序列的重組載體;
2.?對于測序正確的重組質(zhì)粒,提取和純化高質(zhì)量(不含內(nèi)毒素)的重組質(zhì)粒;
3.?使用高效重組載體和慢病毒包裝質(zhì)粒共轉(zhuǎn)染293T細胞,進行病毒包裝并收集上清液;
4.?通過超濾和超速離心濃縮和純化病毒;
5.?用病毒液感染293T細胞,測定病毒滴度;
?
????用高質(zhì)量的病毒液感染靶細胞,通過定量PCR或者Westenblot檢測目的基因表達,也可以進一步進行穩(wěn)定細胞株的篩選用于長期的功能學(xué)研究。
3、?RNAi與慢病毒載體技術(shù)服務(wù):
近年來的研究表明,將與mRNA對應(yīng)的正義RNA和反義RNA組成的雙鏈RNA(dsRNA)導(dǎo)入細胞,可以使mRNA發(fā)生特異性的降解,導(dǎo)致其相應(yīng)的基因沉默。這種轉(zhuǎn)錄后基因沉默機制(PTGS)被稱為RNA干擾(RNAi)。通過構(gòu)建RNAi表達載體制備shRNA(發(fā)卡結(jié)構(gòu)小干擾RNA),已成為進行RNA干擾實驗的常用手段之一。而目前為了感染原代細胞和難感染的細胞系或者在動物水平進行RNAi,研究科學(xué)家更多的選擇了慢病毒載體。在RNAi的研究中,為了感染原代細胞和難感染的細胞系,科學(xué)家開始借助于病毒載體實現(xiàn)RNAi;由于慢病毒可以同時感染分裂和非分裂細胞、整合性以及免疫原性低等優(yōu)點,目前在RNAi的研究中,基于慢病毒構(gòu)建的shRNA被最廣泛的使用。
【本平臺合作項目】
分子診斷、病理診斷、藥效學(xué)評價、毒理學(xué)實驗、細胞藥篩、動物建模、PDX模型、CRISPR/Cas9基因編輯、病理檢測、基因芯片、蛋白組學(xué)、代謝組學(xué)、高通量測序、ChIP、CO-IP、生物信息學(xué)分析、知識產(chǎn)權(quán)服務(wù)!
【全國免費熱線】:400-675-6758
【電話】?023-65316016,023-65316556
【郵箱】?china-western@163.com
【官網(wǎng)網(wǎng)址】www.cqwestern.com
【地址】?重慶市高新區(qū)二郎創(chuàng)業(yè)大道高科創(chuàng)業(yè)園D棟2樓
