蛋白質非標記定量技術服務
產品名稱： 蛋白質非標記定量技術服務
英文名稱： label-free
產品編號：
產品價格： 2000
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更新時間： null
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蛋白質非標記定量技術（label-free）是直接通過液質聯用技術對蛋白質酶解肽段進行質譜分析，無需使用昂貴的穩定同位素標簽做內部標準，只需分析大規模鑒定蛋白質時所產生的質譜數據，比較不同樣品中相應肽段的信號強度，從而對肽段對應的蛋白質進行相對定量。
技術原理
運用DeCyder MSTM軟件，領先的蛋白質組學定性定量算法MaxQuant，對液相色譜串聯質譜數據非標記定量分析是將質譜數據由譜峰形式轉化為直觀的類似雙向凝膠的圖譜，譜圖上每一個點代表一個肽段，而不是蛋白質；再比較的不同樣本上相應肽段的強度，從而對肽段對應的蛋白質進行相對定量。
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實驗流程
檢測儀器
Thermo Scientific Q Exactive
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技術優勢
1.?對LC-MS的穩定性和重復性要求較高；
2.?不受樣本條件限制，可進行大批量樣本的檢測；
3.?無需昂貴的同位素標簽做內標，實驗費用低；
4. 對于低豐度蛋白的檢測效率較高。
樣本要求
樣本類型 | 樣本要求 |
蛋白質提取液 | 濃度達1μg/μl，總蛋白量達300μg ? |
細胞樣本 | 細胞量達107 |
組織樣本 | 動物、微生物組織濕重達10mg；植物鮮嫩組織達100mg ? |
體液樣本 | 血液體積大于500μl |
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代表性文獻
1.?Dislich B, et al. Lable-free quantitative proteomics of mouse cerebrospinal fluid detects BACE1 protease substrates in vivo. Mol Cel Proteomics，2015；14（10）.
Cholewa B D, et al. Large-scale label-free comparative proteomics analysis of polo-like kinase 1 inhibition via the small-molecule inhibitor BI 6727(Volasertib) in BRAFV60E mutant melanoma cells. J Proteome Res，2014；13(11):5041-5050.