Rosa26位點基因敲入小鼠模型
產品名稱: Rosa26位點基因敲入小鼠模型
英文名稱: Western Biotechnology Inc
產品編號:
產品價格: 詳詢023-65316016,023—65316556
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更新時間: 2023-07-31T09:56:51
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Rosa26位點基因敲入小鼠模型
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一、Rosa26位點基因敲入小鼠模型:
指在Rosa26位點引入某種基因的轉基因小鼠模型。傳統的轉基因小鼠一般通過利用質粒進行受精卵原核注射的方式來制備,通常會得到多個品系(Founders)。不同品系由于質粒在染色體上的整合位點不同、拷貝數不同,不同品系之間不容易得到一致的結果。而且由于轉基因小鼠傳代后,轉基因的拷貝數稀釋以及基因沉默等原因,同一品系的表型在傳代過程中也很容易丟失,造成實驗結果不能重復。現在大部分實驗室都是通過定點轉基因的方式來制備轉基因小鼠。其中用的最多的位點是Rosa26位點。
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二、優勢與不足:
優勢:
1、外源基因的重組位置確定;2、只有1個拷貝的插入;3、結合Cre-loxP系統,可以使外源基因在特定組織及特定時間表達;4、與隨機轉基因相比,需要的小鼠量小。
不足:1、與隨機轉基因相比,模型構建需要的時間更長;2、遺傳背景受到ES細胞背景的限制。
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三、Rosa26位點基因敲入小鼠模型原理:
Rosa26基因敲入技術最早是由Phillipe Soriano建立并發展起來的。Rosa26位點有兩個外顯子,外源DNA序列插入兩個外顯子之間。在最初的設計中,目的基因cDNA上游帶有一段轉錄終止序列“STOP”(3個拷貝的SV40多聚A序列,tPA),轉錄終止序列的兩端各有一個Loxp位點,將此結構定點嵌入Rosa26基因位置,整個結構的轉錄受Rosa26啟動子控制。在沒有Cre的情況下,由于Rosa26啟動子與目的基因之間“STOP”的存在,目的基因不能被表達。如果有Cre表達, Cre重組酶將去除“STOP”,Rosa26啟動子就可以啟動目的基因表達。大量研究證實,Rosa26基因幾乎在所有組織中都能編碼一種非必需的核RNA,且為外源基因的插入熱點。而Rosa26位點基因嵌入技術可以非常有效地建立多用途的條件性轉基因小鼠模型,所以越來越受到科學家的青睞。但是,由于Rosa26啟動子在某些組織中的啟動能力有限,目的基因經常達不到研究人員需要的表達水平。為了解決這一問題,對原Rosa26基因敲入系統做了改進,引入一個強效的啟動子,如CAG啟動子, 該啟動子由雞actin啟動子和CMV增強子融合而成,用這一雜合啟動子代替Rosa26啟動子,能夠高效地啟動目的基因表達。
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四、Rosa26位點基因敲入小鼠模型應用
1、基因的過表達研究;2、外源基因在小鼠體內表達及功能研究。
五、服務流程:
1、方案評估
2、方案報價
3、確定服務內容
4、簽訂服務合同
5、進行實驗,定期向客戶反饋
6、整理實驗報告
7、完成合同內容
8、售后服務
9、合作完成
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