慢病毒RNAi干擾服務
產品名稱: 慢病毒RNAi干擾服務
英文名稱: Lentivirus RNA-mediated Interference
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佰萊福(上海)生物科技有限公司
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基本原理
1.替代瞬時表達載體使用;
2.lentivirus-shRNA/miRNA經慢病毒包裝,轉染(難于轉染的細胞系)如原代/懸浮/處于非分裂的細胞,整合到受感染細胞的基因組,長時間穩定表達miRNA。
服務流程
1.客戶提供:表達miRNA/shRNA的質粒(提供測序圖譜)或者所要Konckdown的靶基因的名稱、序列;所需的病毒滴度及總量、病毒是否需要純化;若需要檢測靶基因的表達變化,如需要請提供相應的抗體。
2.含目的基因的慢病毒RNAi干擾載體的構建和純化提取;
3.慢病毒干擾載體、pGag/Pol、pRev、pVSV-G四質粒共轉染293T細胞;
4.培養48-72小時,收集上清;
5.病毒的純化和濃縮;
6.滴度測定、目的基因鑒定;
7.將制得的慢病毒液轉導客戶的靶細胞,篩選混合穩定細胞株,并檢測靶基因的表達;
8.我們提供:重組后的慢病毒載體質粒,并附上PCR鑒定結果;提供已測定的滴度、可以直接進行后續分析的慢病毒儲存液。
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