仁源生物技術(上海)有限公司
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基因過表達小鼠,是指將目的DNA片段構建到過表達載體中,然后通過受精卵的原核注射,將其整合到小鼠的基因組DNA上,從而實現該DNA片段的過量表達的實驗過程。
依據實驗目標和轉入DNA片段的不同,主要可以分為以下幾種類型:
a)??? 過表達小鼠
主要目的是實現目的基因的過表達,其過表達載體的結構如下:

依據啟動子的強弱、特異性等特性的選擇,可以控制目的基因過表達的強弱和組織(器官)特異性。也可以在目的基因上加入特定的標簽(Tag)或熒光蛋白(如EGFP),方便檢測、示蹤或純化。
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b)??? RNAi小鼠

通常采用U6/H1啟動子啟動shRNA的表達,在基因表達的過程中,通過shRNA的干擾作用,達到對目的基因表達的沉默抑制,實現對基因功能的研究。
c)??? MicroRNA小鼠


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通過構建上面兩種miRNA載體,可以實現過表達或者抑制。
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d)??? 可誘導性小鼠

通過構建上述結構的載體,并通過原核注射受精卵轉入小鼠體內。這種情況下,小鼠在出生和發育時,該基因正常表達。只有與CreER小鼠雜交以后,然后在Tamoxifen誘導下,Cre酶將兩個LoxP之間的Stop元件切除,目的基因實現過表達。
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構建基因過表達小鼠的實驗流程:(2-4個月)
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