多肽組合化學技術的常用方法與實例-多針法與茶袋法
產品名稱： 多肽組合化學技術的常用方法與實例-多針法與茶袋法
英文名稱： 多肽組合化學技術的常用方法與實例
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?1多針法(Multipin synthesis)聚乙烯針狀小棒為固相載體，先在小棒一端聯上連肽結構另一端則固定于板上，每塊板可固定幾十支平行排列的小棒，注意排列要規則，兩針間距離適宜。反應時將此板小棒頭浸于相對應滴度板滴度槽中進行縮合反應，整個過程采用Merrifield標準合成方法完成，最后脫去保護基，但不從載體上切下抗原肽鏈，讓肽段懸掛于樹脂上可多次重復的進行活性研究。實例:1985年Geysen等以口蹄疫病毒抗原決定簇為目標，配以靈敏的ELISA分析法(準確度在10-12mol水平，而每根小棒端可合成肽量至少在10-9mol以上)。將針尖表面接上H2N-b-Ala-Lys (oMe)-NH-連肽結構后以96(8*12排)排列固定在一塊板上，與帶有96穴的滴度板匹配，進行接肽反應，完成六肽片段的一位差同步多重合成后，肽鏈脫除保護基，仍掛在小棒上，直接進行ELISA檢測即帶有肽鏈小針的固定板浸入標記酶液中進行抗原體反應，形成酶標記抗原抗體復合物，利用抗原抗體物對標記酶產生的調節(抑制或恢復活性)或顯色反應，計算被檢物含量，以檢出含量最高即是親合力最強的區域為高活性，將此區小棒取下，裂解肽段，純化再進行杭體/受體/酶結合實臉。Geysen等3年用此法合成了20萬個肽類似物，完成了此抗原肽庫的篩選。1988年Geysen又系統地完成了鯨紅蛋白肽鏈上各可能的6肽片段的免疫原，找到較可靠的抗原決定簇部位，檢側了其中一個免疫活性片段(5肽)被20種氨基酸進行任意置換的有效性。正丙醛