轉基因動物/ES打靶技術/基因敲除鼠純合子篩選、繁育、保種
產品名稱: 轉基因動物/ES打靶技術/基因敲除鼠純合子篩選、繁育、保種
英文名稱: western
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產品價格: 咨詢:023-65316016/ 65316556
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更新時間: 2023-11-16T15:04:29
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轉基因動物/ES打靶技術/基因敲除鼠純合子篩選、繁育、保種
???目前,生物醫藥行業對于各種實驗動物模型以及相關技術服務的需求日益增長。經過長期的發展和探索,威斯騰“實驗動物轉基因和基因敲除”服務平臺在專家團隊的帶領下,已經形成非常成熟的服務體系,其中主要的服務項目包括以下方面:
一、轉基因小鼠制備
? ? 將一段外源DNA顯微注射到小鼠受精卵雄原核中,從而使這段外源DNA整合到受精卵的染色體里,再將受精卵移植到假孕代孕母鼠,產生帶有外源基因的子代小鼠,從而建立外源基因穩定整合的轉基因小鼠。本服務接受委托方提供的基因表達載體(包括普通的質粒載體和BAC),亦可根據委托方要求代為構建。根據委托方的不同需求,轉基因小鼠制備周期3~6個月,項目完成后提供不少于3只轉基因陽性首建者小鼠,以及相關的實驗材料和技術資料。
該項工作主要包括以下幾個部分:
1.轉基因載體構建和制備
2.原核注射
3.轉基因小鼠的飼養和鑒定
?二、基因剔除(敲入)小鼠制備
? ?采用同源重組策略對小鼠基因組特定位點進行遺傳修飾,可根據需要實現常規基因剔除或條件性基因剔除。對于基因剔除項目,委托方只需提供基因名稱或Genebank序列即可,對于基因敲入項目接受委托方構建的打靶載體,亦可根據委托方要求代為構建。項目完成后提供不少于3只陽性雜合子小鼠。
基因剔除(敲入)小鼠制備主要包括以下步驟:
1)載體設計和構建
2)胚胎干細胞的電轉和培養
3)陽性克隆的篩選和鑒定
4)胚胎干細胞顯微注射
5)飼養和傳代
6)運輸所有課題相關材料(包括一籠不少于3只陽性雜合子小鼠,和所有陽性重組胚胎干細胞)
三、細胞技術服務
1)提供小鼠胚胎成纖維細胞(Mouse?embryonic?fibroblasts,?MEFs);
2)小鼠胚胎干細胞的培養、體外分化及相關的細胞學實驗;
3)為客戶提供特殊品系小鼠胚胎干細胞的分離制備服務,并利用特殊品系胚胎干細胞進行基因打靶。
四、小鼠胚胎操作、品系建立與鼠種保存
1)小鼠胚胎的采集、凍存和凍存胚胎的復蘇;
2)小鼠體外受精、胚胎生物凈化、小鼠嵌合胚胎的制備;
3)提供小鼠飼養、繁殖、基因型鑒定及品系建立的技術服務
五、基因工程小鼠遺傳鑒定與表型分析
1)分離鼠尾基因組DNA;
2)應用PCR或southern?blot方法分析小鼠基因型;
3)應用免疫組化或流式細胞儀分析轉基因小鼠的基因表達。
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威斯騰實驗服務流程

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威斯騰生物服務項目
| 分子生物學檢測 | 蛋白質與免疫學 | 動物實驗 |
| 實時熒光定量PCR | 單克隆抗體制備 | 帕金森疾病模型 |
| 免疫共沉淀(Co-IP) | 多克隆抗體制備 | 抑郁癥動物模型 |
| ELISA(酶聯免疫吸附法)技術 | Western-blot?實驗服務 | 脊髓損傷模型 |
| 生化指標檢測 | 蛋白雙向電泳實驗服務 | 腦外損傷模型 |
| 雙熒光素酶報告基因檢測 | 原核蛋白表達純化 | 骨神經損傷模型 |
| 染色質免疫共沉淀(ChIP) | 真核蛋白表達純化 | 心肌缺血模型 |
| GST?pull?Down | ITRAQ定量蛋白質組學 | 心力衰竭模型 |
| SLAC蛋白組學 | 肺動脈高血壓動物模型 | |
| 高血壓模型 | ||
| 病毒包裝 | 實驗課題整體外包 | 粥樣動脈硬化模型 |
| 過表達/干擾慢病毒包裝純化 | 整體課題外包 | 大腦中動脈阻塞模型 |
| 過表達/干擾腺病毒包裝純化 | 細胞整體實驗外包 | 慢性之氣管炎模型 |
| 逆轉錄病毒包裝純化 | 動物整體實驗外包 | 過敏性哮喘模型 |
| 腺相關病毒包裝純化 | 肺炎大鼠模型 | |
| 肝炎-肝硬化-肝癌模型 | ||
| 蛋白芯片 | 原代細胞培養 | 肝纖維化模型 |
| 細胞因子芯片 | 骨髓間充質干細胞培養 | 膽結石模型 |
| BioPlex懸浮芯片 | 脂肪干細胞培養 | 急性胰腺炎模型 |
| 生長因子芯片 | 心肌成纖維細胞培養 | 急性腎衰竭模型 |
| 炎癥因子芯片 | 軟骨細胞培養 | 體內血栓模型 |
| 血管生成因子芯片 | 血管內皮細胞培養 | 關節炎模型 |
| 凋亡因子芯片 | 神經元細胞培養 | I型和II型糖尿病模型 |
| 趨化因子芯片 | 內皮組細胞原代培養 | 裸鼠成瘤 |
| HuProt?TM?20K人類蛋白組芯片 | 基因編輯動物 | |
| 電生理相關服務 | 動物整體實驗服務 | |
| 膜片鉗實驗 | ||
| 細胞生物學檢測 | 高通量測序 | 代謝組學 |
| 細胞原代培養 | mRNA測序 | 氣相色譜GC/MS |
| MTT檢測 | LncRNA測序 | 液相色譜LC/MS |
| 細胞凋亡檢測 | 全基因組測序 | 核磁共震NMR |
| 細胞周期檢測 | RNA-Seq測序 | |
| 細胞克隆形成實驗 | 外顯子測序 | 影像學相關實驗 |
| Transwell細胞遷移/侵襲 | 16s擴增子測序 | Micro-CT |
| 流式分選 | Small?RNA測序 | 小動物活體成像 |
| CCK8/XTT檢測 | 宏基因組測序 | 核磁共振 |
| 臺盼藍檢測細胞活性 | 單細胞測序 | PET-CT |
| 藥物篩選細胞學實驗 | circleRNA測序 | |
| 細胞粘附性檢測 | 甲基化測序 | 基因編輯動物 |
| 細胞劃痕實驗 | 條件性敲除小鼠/大鼠 | |
| 細胞生物學整體實驗 | 全基因敲除小鼠/大鼠 | |
| 細胞成管實驗 | ||
| 病理檢測 | CRISPR/Cas9細胞敲除/敲入 | 基因芯片 |
| 掃描電鏡 | 基因定點突變細胞系 | LncRNA芯片 |
| 透射電鏡 | 單基因敲除細胞系 | miRNA芯片 |
| HE染色 | 多基因敲除細胞系 | mRNA芯片 |
| 免疫組化 | 目的基因敲入細胞系 | 甲基化芯片(限人和小鼠來源樣本) |
| Tunel(原位末端凋亡法)檢測 | 報告基因敲入細胞系 | SNP芯片(限人和小鼠來源樣本) |
| 激光共聚焦 | miRNA/LncRNA敲除細胞系 | |
| 免疫熒光 | ||
| Masson染色 | CRISPR/Cas9動物敲除/敲入 | 科研設計指導&文章評估/潤色 |
| 原位雜交 | 基因敲除大鼠/小鼠 | 科研文獻論著翻譯 |
| 熒光原位雜交 | 基因敲入大鼠/小鼠 | 論文翻譯潤色服務 |
| 特殊染色(PSA、茜素紅、阿爾新藍等) | 臨床實驗/科研實驗設計方案指導 | |
| 行為學檢測 | 藥物篩選服務項目 | 藥效學評價 |
| 曠場實驗 | 高通量自動藥物篩選平臺 | 抗腫瘤藥物藥效學評價 |
| 重復性刻板行為檢測 | 細胞高內涵藥物篩選平臺 | 心血管系統藥物藥效學評價 |
| 動物跑臺檢測 | 蛋白質組學靶標研發平臺 | 泌尿系統藥物藥效學評價 |
| 強迫游泳 | 分子藥理研究平臺 | 內分泌系統藥物藥效學評價 |
| 生物膜片鉗藥物篩選平臺 | 抗炎免疫藥物藥效學評價 | |
| 常規藥物體外篩選 |
【本平臺合作項目】
分子生物學、細胞生物學、基因敲出/入、模式動物、SPF動物保種、病理學檢測、免疫學檢測、影像學檢測、原代培養、細胞藥篩、CRISPR/Cas9基因編輯、基因芯片、高通量測序、蛋白組學、代謝組學、高通量高內涵篩選、藥效學評價、藥理毒理學實驗、慢病毒包裝與穩轉株建立、SiRNA與納米載藥、ChIP、CO-IP、生物信息學分析、知識產權服務!?
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