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酵母單/雙雜交市場宣傳資料

一、酵母單雜交：

酵母單雜交技術是在酵母雙雜基礎上發展而來的一種研究核酸-蛋白相互作用的工具，被廣泛用于研究真核細胞內基因的表達調控，如鑒別DNA結合位點發現潛在的結合蛋白基因、分析DNA結合結構域信息等。

二、酵母雙雜交：

酵母雙雜交及系統是一種鑒定和檢測蛋白質相互作用的研究方法，因其具有靈敏性高、功能強大、適用范圍廣等特點，現已被應用于多個研究領域。

（一）核蛋白酵母雙雜交：

核蛋白酵母雙雜交技術最初由Fields等人在研究酵母轉錄因子GAL4性質時建立，后續經過不斷改進已發展成為一種成熟的蛋白-蛋白互作研究工具，具有簡便、靈敏、可反映蛋白在活細胞內互作真實情況的特點，被廣泛應用于互作蛋白的篩選、蛋白相互作用的鑒定/驗證、蛋白互作機理的探究、蛋白連鎖圖譜繪制等工作。

（二）膜蛋白酵母雙雜交：

DUALmembrane技術在傳統的酵母雙雜交系統的基礎上，巧妙地利用分離的泛素系統（split-ubiquitin）進行蛋白質相互作用的篩選；泛素作為降解信號分子，人為分成兩部分：N端（Nub），C端（Cub），互補重構的完整泛素分子可被泛素專一性蛋白酶（UBPs）識別，從而導致與泛素相連的蛋白被酶解。

三、多領域的研究利器：

植物：自交不親和機理研究……

病毒：朊蛋白、病毒蛋白相互作用蛋白篩選……

信號通路：轉錄因子、雌激素α受體相互作用蛋白篩選……

癌癥醫學：癌癥相關蛋白、凋亡相關蛋白相互作用蛋白篩選……

寄生蟲醫學：毒力因子致病機制研究、半乳糖凝集素互作蛋白篩選……

基礎原理研究：肌球蛋白、蛋白酶體調節因子相互作用蛋白篩選、受精卵發育……

四、獨特的技術優勢：

一站式輔助檢測手段方便快捷，得到可靠的實驗結論；

多年文庫構建經驗，4種優化的Total RNA提取技術方案可以有效保證Total RNA的純度和完整性，保證樣本的多樣性；

高效的SM定向三框文庫構建技術可以保證文庫的陽性率在98%以上，且一份cDNA樣本連接三個不同的讀碼框載體可以輕松實現三框文庫的質控指標零差異，減少文庫差異對篩選結果的影響；

定向改造了pPR3-N系列載體為pPR3-GW載體，可以輕松實現核蛋白文庫到膜蛋白文庫的一步LR反應，獲得膜蛋白酵母雙雜交文庫。

五、文庫構建策略比較：

六、服務流程：

（一）酵母單/雙雜交文庫構建：

接收訂單及樣品→總RNA提取→mRNA純化→反轉錄→雙鏈cDNA合成及純化→共轉至酵母感受態細胞（改造的Y1H）→轉化效率測定→文庫效價測定→結果交付

（二）酵母單雜交文庫篩選：

接收訂單及樣品→誘餌載體及誘餌菌株構建→自激活檢測→克隆數計算→陽性克隆菌株鑒定→結果交付

（三）酵母雙雜交文庫篩選：

接收訂單及樣品→誘餌載體的構建→毒性檢測→測定雜交效率→陽性克隆菌株鑒定→結果交付

七、服務內容：

（一）酵母單雜交：