穩(wěn)轉細胞株的構建
產品名稱: 穩(wěn)轉細胞株的構建
英文名稱: wenzhuanxibaozhudegoujian
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穩(wěn)轉細胞株的構建
外源基因在細胞中的表達可分為兩大類,一類是瞬時表達,一類是穩(wěn)定表達(永久表達)。前者外源DNA/RNA不整合到宿主染色體中,雖然可以達到高水平的表達,但通常只持續(xù)幾天,而后者外源DNA整合到宿主細胞染色體上,使宿主細胞可長期表達目的基因,穩(wěn)轉細胞系的構建即為后者。建立穩(wěn)定細胞株,一般是根據(jù)不同基因載體中所含有的抗性標志選用相應的藥物對靶細胞進行篩選。最常用的抗性標記基因有潮霉素(hygromycin)、新霉素(neomycin)和嘌呤霉素(puromycin),常用Hygromycin B、G418和puromycin進行選擇性篩選。
穩(wěn)定表達細胞株在細胞中能持續(xù)穩(wěn)定表達特定基因或干擾特定基因表達。目的基因質粒DNA整合到細胞染色體上,使細胞長期穩(wěn)定表達該基因。穩(wěn)定表達細胞株彌補了瞬時感染(或轉染)一些功能實驗中由于外源基因表達時間短的缺陷,便于長期觀察基因對于細胞功能的影響以及蛋白間相互作用。

神經元細胞(慢病毒感染后5d)

SP1/0細胞(慢病毒感染后48hr)
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