RNA提取及反轉錄
產品名稱： RNA提取及反轉錄
英文名稱： RNA提取及反轉錄
產品編號： YK1372
產品價格： 80元/樣
產品產地： 西安
品牌商標： Y&KBIO
更新時間： 2024-10-10T15:34:21
使用范圍： null
| 規格 | 價格 |
| 張 |
- 聯系人 : 張女士
- 地址 : 陜西省西咸新區灃西新城灃潤西路2556號聯東U谷灃西科技創新谷2號樓8-1室
- 郵編 :
- 所在區域 : 陜西省
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服務介紹： 細胞中的RNA可分為信使RNA、轉運RNA和核糖體RNA三大類，不同組織總RNA提取實質就是將細胞裂解，釋放出RNA，并通過不同方式去除蛋白、DNA等雜質，最終獲得高純RNA產物的過程。再在逆轉錄酶的催化下，隨機引物、oligo(dT)或基因特異性引物的引導下合成互補的DNA (complementary DNA，cDNA)。 實驗流程： 取材-RNA提取-測濃度-逆轉錄成cDNA 其中mRNA、lncRNA、circRNA為普通逆轉錄； miRNA采取特異性逆轉錄(需提供基因名稱和種屬，方便設計引物用于特異性逆轉錄 )，默認做莖環法的逆轉錄，如需做加尾法逆轉錄請特別備注說明。 樣本收集： 1、細胞板貼壁細胞收集： ?? 細胞棄培養上清，預冷PBS輕柔洗滌保證完全去除培養基。加少量預冷的PBS用細胞刮刀將細胞收集于凍存管，4℃1500rpm離心去除上清后得到細胞，置于液氮速凍。 2、細胞團塊收集： 細胞團塊加1ml PBS重懸（注意不要過于劇烈造成細胞破裂），4℃ 1000rpm離心5分鐘，棄上清，重復3次，4℃1500rpm離心去除上清后得到細胞，置于液氮速凍。 3、懸浮細胞收集： 將培養完成的細胞，轉移至EP管，1000rpm離心5分鐘，棄上清，4℃1500rpm離心去除上清后得到細胞，置于液氮速凍。 裂解：貼壁細胞去除培養基后直接加trizol，團塊和懸浮細胞在收集到細胞后加適量Trizol重懸（10^6細胞之內加1mlTrizol）。所有細胞樣本在加入裂解液后需要用移液器吹打至無明顯細胞殘渣。 4.組織收集：取材應在冰上進行，取材后組織用生理鹽水沖洗干凈，去除血漬和污物，并剔除非研究所需的組織。取動物的組織，動作要求迅速，盡量避免樣本在環境中暴露太久。 5.運輸：使用大體積干冰運輸； 6.取樣量：細胞10^6以上，組織：50mg