技術(shù)服務(wù)---小鼠單克隆抗體制備
產(chǎn)品名稱： 技術(shù)服務(wù)---小鼠單克隆抗體制備
英文名稱： none
產(chǎn)品編號(hào)：
產(chǎn)品價(jià)格： 詢價(jià)
產(chǎn)品產(chǎn)地： null
品牌商標(biāo)： null
更新時(shí)間： 2024-01-22T15:19:33
使用范圍： null
- 聯(lián)系人 : 索萊寶-龔思雨
- 地址 : 北京市北京經(jīng)濟(jì)技術(shù)開發(fā)區(qū)環(huán)科中路16號(hào)26幢3層301
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- 所在區(qū)域 : 北京
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?一、服務(wù)內(nèi)容
1.抗原準(zhǔn)備；
2.免疫Balb/C小鼠；
3.小鼠抗血清檢測(cè)（WB/ELISA檢測(cè)內(nèi)源性蛋白）；
4.檢測(cè)結(jié)果合格進(jìn)行細(xì)胞融合及細(xì)胞株的篩選、亞克隆、建立穩(wěn)定分泌抗體的細(xì)胞株；
5.細(xì)胞株分泌抗體重鏈（Fcγ）亞型鑒定；
6.抗體擴(kuò)大生產(chǎn)、制備腹水以及Protein A/G純化。
二、抗原要求
1.蛋白抗原：蛋白總量>4mg、濃度＞1mg/ml、純度>85%、分子量>10KDa；
2.多肽抗原：多肽重量>4mg、純度>95%；
3.細(xì)菌等抗原：咨詢。
三、收費(fèi)標(biāo)準(zhǔn)
?
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步驟 |
內(nèi)容 |
時(shí)間 |
標(biāo)準(zhǔn) |
收費(fèi) |
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免疫 |
三次免疫后（效價(jià)達(dá)不到融合要求繼續(xù)免疫）測(cè)尾血效價(jià) |
10周 |
免疫5只Balb/c小鼠，免疫量100ug/只,最終達(dá)到融合效價(jià)>1:10000 |
￥2000 |
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融合 |
采用已優(yōu)化的條件進(jìn)行高效融合 |
1天 |
取脾臟分離成單細(xì)胞與對(duì)數(shù)期的SP2/0按5：1混合，進(jìn)行細(xì)胞融合，20%胎牛血清，HAT選擇培養(yǎng)基，鋪10塊板 |
￥8000 |
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上清 |
融合7天后，ELISA檢測(cè)，用檢測(cè)抗原包被ELISA板，二抗anti-mouse HRP，TMB顯色 |
1天 |
陰性（正常培養(yǎng)基）OD<0.1陽性OD>0.5視為陽性孔 |
￥6000 |
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亞克隆 |
對(duì)陽性孔采用有限稀釋法進(jìn)行亞克隆直到含有細(xì)胞的所有孔均為陽性 |
3周 |
ELISA檢測(cè)挑選OD值高的細(xì)胞孔，進(jìn)行后續(xù)亞克隆直到含有細(xì)胞的所有孔均為陽性 |
￥10000 |
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定株 |
陽性穩(wěn)定的孔進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng) |
1周 |
擴(kuò)大培養(yǎng)上清，按客戶要求進(jìn)行功能檢測(cè)（WB/ELISA/IHC），滿足客戶要求后，將應(yīng)客戶要求交付3株細(xì)胞（每株細(xì)胞2管） |
￥6000 |
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腹水 |
指定細(xì)胞株生產(chǎn)10mL腹水 |
1周 |
離心后10mL腹水 |
￥4000 |
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亞型 |
應(yīng)客戶要求測(cè)定細(xì)胞株亞型 |
1周 |
測(cè)定重鏈和輕鏈亞型 |
￥2000 |
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純化 |
ProteinA或G純化10mL腹水 |
1周 |
根據(jù)亞型選擇ProteinA或G |
￥2000 |
?
四、客戶提供材料
1.蛋白抗原、多肽抗原、細(xì)菌等；
2.抗原信息及相關(guān)文獻(xiàn)（可選）。
五、提交給客戶結(jié)果
1.實(shí)驗(yàn)報(bào)告；
2.細(xì)胞株、抗體。
六、服務(wù)說明
1.多肽合成需要另行收費(fèi)；
2.抗血清檢測(cè)如果不能達(dá)到我們的要求（1:10000以上），不進(jìn)行后續(xù)實(shí)驗(yàn)服務(wù)；
3.特殊要求另行協(xié)商；
4.磷酸化、甲基化、乙?；忍厥庑揎梿慰沽硇袇f(xié)商。
5.最終提供10mg抗體，超過10mg，收費(fèi)標(biāo)準(zhǔn)為100元/1mg.