技術服務---小鼠單克隆抗體制備
產品名稱： 技術服務---小鼠單克隆抗體制備
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更新時間： 2024-01-22T15:19:33
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?一、服務內容
1.抗原準備；
2.免疫Balb/C小鼠；
3.小鼠抗血清檢測（WB/ELISA檢測內源性蛋白）；
4.檢測結果合格進行細胞融合及細胞株的篩選、亞克隆、建立穩定分泌抗體的細胞株；
5.細胞株分泌抗體重鏈（Fcγ）亞型鑒定；
6.抗體擴大生產、制備腹水以及Protein A/G純化。
二、抗原要求
1.蛋白抗原：蛋白總量>4mg、濃度＞1mg/ml、純度>85%、分子量>10KDa；
2.多肽抗原：多肽重量>4mg、純度>95%；
3.細菌等抗原：咨詢。
三、收費標準
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步驟 |
內容 |
時間 |
標準 |
收費 |
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免疫 |
三次免疫后（效價達不到融合要求繼續免疫）測尾血效價 |
10周 |
免疫5只Balb/c小鼠，免疫量100ug/只,最終達到融合效價>1:10000 |
￥2000 |
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融合 |
采用已優化的條件進行高效融合 |
1天 |
取脾臟分離成單細胞與對數期的SP2/0按5：1混合，進行細胞融合，20%胎牛血清，HAT選擇培養基，鋪10塊板 |
￥8000 |
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上清 |
融合7天后，ELISA檢測，用檢測抗原包被ELISA板，二抗anti-mouse HRP，TMB顯色 |
1天 |
陰性（正常培養基）OD<0.1陽性OD>0.5視為陽性孔 |
￥6000 |
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亞克隆 |
對陽性孔采用有限稀釋法進行亞克隆直到含有細胞的所有孔均為陽性 |
3周 |
ELISA檢測挑選OD值高的細胞孔，進行后續亞克隆直到含有細胞的所有孔均為陽性 |
￥10000 |
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定株 |
陽性穩定的孔進行擴大培養 |
1周 |
擴大培養上清，按客戶要求進行功能檢測（WB/ELISA/IHC），滿足客戶要求后，將應客戶要求交付3株細胞（每株細胞2管） |
￥6000 |
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腹水 |
指定細胞株生產10mL腹水 |
1周 |
離心后10mL腹水 |
￥4000 |
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亞型 |
應客戶要求測定細胞株亞型 |
1周 |
測定重鏈和輕鏈亞型 |
￥2000 |
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純化 |
ProteinA或G純化10mL腹水 |
1周 |
根據亞型選擇ProteinA或G |
￥2000 |
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四、客戶提供材料
1.蛋白抗原、多肽抗原、細菌等；
2.抗原信息及相關文獻（可選）。
五、提交給客戶結果
1.實驗報告；
2.細胞株、抗體。
六、服務說明
1.多肽合成需要另行收費；
2.抗血清檢測如果不能達到我們的要求（1:10000以上），不進行后續實驗服務；
3.特殊要求另行協商；
4.磷酸化、甲基化、乙酰基化等特殊修飾單抗另行協商。
5.最終提供10mg抗體，超過10mg，收費標準為100元/1mg.