慢病毒，腺病毒，以及RNAi\基因過表達專業服務
產品名稱： 慢病毒，腺病毒，以及RNAi\基因過表達專業服務
英文名稱： RNAi
產品編號：
產品價格： 詢價
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品牌商標： null
更新時間： 2023-07-31T09:56:51
使用范圍： null
威斯騰生物技術服務中心是一家從事生命科學研究、產品開發和實驗技術服務的專業機構，目前主要從事基因診斷試劑的研發以及分子生物學、細胞生物學和免疫學相關領域的技術服務。我們的宗旨是：加強學術交流，推動科研發展，科學，嚴謹，求實，專業。現推出如下實驗技術服務：
?我中心可以為廣大科研朋友提供慢病毒載體構建，腺病毒載體的構建，腺病毒的擴增，包裝，純化。以及慢病毒的包裝和純化。基因的過表達，以及RNAI相關的研究。
1、慢病毒的簡介：
Lentivirus是逆轉錄病毒的一種，具有逆轉錄病毒的基本結構和特性；能整合入宿主細胞基因組，長期表達，可用于轉基因動物制備；但也有不同于逆轉錄病毒的組分和特性；比逆轉錄病毒具有更高的滴度，不僅可以感染分裂細胞，更重要的是還能感染非分裂的細胞。
利用Lentivirus構建的shRNA表達載體，與化學合成的siRNA和基于瞬時表達載體構建的shRNA相比，一方面可以替代后者，另一方面，Lentivirus-shRNA載體經包裝系統包裝后，可用于感染依靠傳統轉染試劑難于轉染的細胞（如原代細胞、懸浮細胞等），并且在感染后可以整合到受感細胞的基因組，進行長時間的穩定表達，是制備穩定表達shRNA細胞株和進行體內實驗(in vivo)的最有效手段。
目前我們能夠為客戶提供從載體構建到慢病毒包裝純化和檢測的一站式服務； 同時公司還在高效慢病毒生產技術的基礎上建立并完善了慢病毒載體制備轉基因動物的實驗技術。
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2、慢病毒載體構建包裝實驗流程如下：
- 根據目的基因相關信息（序列，基因序列號等），構建含有外源基因或序列的重組載體；
- 對于測序正確的重組質粒，提取和純化高質量（不含內毒素）的重組質粒；
- 使用高效重組載體和慢病毒包裝質粒共轉染293T?細胞，進行病毒包裝并收集上清液；
- 通過超濾和超速離心濃縮和純化病毒；
- 用病毒液感染293T細胞，測定病毒滴度；
用高質量的病毒液感染靶細胞，通過定量PCR或者Westenblot檢測目的基因表達，也可以進一步進行穩定細胞株的篩選用于長期的功能學研究。
3、?RNAi與慢病毒載體技術服務：
近年來的研究表明，將與mRNA對應的正義RNA和反義RNA組成的雙鏈RNA(dsRNA)導入細胞，可以使mRNA發生特異性的降解，導致其相應的基因沉默。這種轉錄后基因沉默機制(PTGS)被稱為RNA干擾（RNAi）。通過構建RNAi表達載體制備shRNA(發卡結構小干擾RNA)，已成為進行RNA干擾實驗的常用手段之一。?而目前為了感染原代細胞和難感染的細胞系或者在動物水平進行RNAi，研究科學家更多的選擇了慢病毒載體。在RNAi的研究中，為了感染原代細胞和難感染的細胞系，科學家開始借助于病毒載體實現RNAi；由于慢病毒可以同時感染分裂和非分裂細胞、整合性以及免疫原性低等優點，目前在RNAi的研究中，基于慢病毒構建的shRNA被最廣泛的使用。
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分子診斷、病理診斷、藥效學評價、毒理學實驗、細胞藥篩、動物建模、PDX模型、CRISPR/Cas9基因編輯、病理檢測、基因芯片、蛋白組學、代謝組學、高通量測序、ChIP、CO-IP、生物信息學分析、知識產權服務！
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