GAL4-UAS轉基因果蠅
產品名稱： GAL4-UAS轉基因果蠅
英文名稱： GAL4-UAS
產品編號： ID2
產品價格： 詢價
產品產地： null
品牌商標： null
更新時間： 2025-08-15T14:23:06
使用范圍： null
啟東芳景生物科技有限公司
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GAL4-UAS轉基因
利用attP-PhiC31轉基因技術，把外源物種目標基因轉入黑腹果蠅基因組，通過GAL4-UAS二元調控系統，讓基因在果蠅體內高量表達并進行表型研究。這樣，即可利用黑腹果蠅的科研優勢，將非模式物種基因功能研究簡單化、成熟化和標準化。
全身溫控過表達解決方案：
?技術難題：當GAL4由全身表達的強啟動子驅動時，UAS下游的外源基因會在黑腹果蠅絕大部分細胞過量表達，進而可能產生毒性，導致果蠅生存能力下降甚至死亡。
?解決方案：芳景生物制作并提供了Tubp-GAL4,Tubp-GAL80ts果蠅品系，通過飼養溫度變化控制外源基因表達量，保證在低溫時，轉基因果蠅可以順利生存和擴增，同時也保證高溫熱激之后，目的外源基因進行過量表達。
UAS;GAL4-OR—昆蟲氣味受體與嗅覺研究
UAS;GAL4-OR系統的GAL4-OR驅動品系中，在嗅覺感受器神經元特異性表達的果蠅內源OR基因被敲除并替換成GAL4，使得該神經元失去相應OR基因功能(空神經元)；將昆蟲的外源OR基因轉入黑腹果蠅基因組制作成UAS-OR品系，用GAL4-OR品系驅動后，外源OR基因將獲得與果蠅內源OR基因相同的表達模式，實現在該空神經元中特異性表達。
其他GAL4-UAS品系構建：
除Tubp-GAL4,Tubp-GAL80ts品系外，芳景生物還可提供多種GAL4驅動品系，并負責與UAS轉基因品系構建成穩定遺傳品系，實現外源基因在果蠅中的時空特異性穩定表達。
| attP-PhiC31定點插入(GAL4-UAS過表達果蠅品系構建) | ||
| 實驗步驟 | 內容 | 周期(周) |
| 注射樣品制備 | 1.Donor載體構建：無縫克隆連接 載體：包含attB位點 + UAS + miniWhite marker 片段：包括質粒亞克隆，cDNA克隆，基因合成等方式 2.Donor質粒去內毒素提取 |
1~4 |
| 顯微注射 | 1.注射品系：attP果蠅品系(PhiC31內源表達) 2號染色體：attP40、attP5 3號染色體：attP2、VK00005 2.注射樣品：donor質粒 3.注射胚胎數量：200-300個 |
2 |
| 雜交和篩選 | 1.P0果蠅與平衡子雜交 2.篩選F1陽性果蠅(紅眼) |
2 |
| 分子鑒定 | 1.插入目的序列鑒定 2.插入基因組位置鑒定 |
0 |
| 構建UAS和UAS+GAL4穩定遺傳品系 | 1.F1陽性果蠅雜交雙染色體平衡子 2.構建UAS穩定/純合品系 3.F2果蠅與GAL4驅動品系雜交【1】 4.構建2,3號染色體雙平衡的UAS+GAL4穩定/純合品系【2】 |
8~10 |
| 合計 | 13~18 |
| attP-PhiC31定點插入(GAL4-UAS全身溫控過表達果蠅品系構建) | ||
| 實驗步驟 | 內容 | 周期(周) |
| 注射樣品制備 | 1.Donor載體構建：無縫克隆連接 載體：包含attB位點 + UAS + miniWhite marker 片段：包括質粒亞克隆，cDNA克隆，基因合成等方式 2.Donor質粒去內毒素提取 |
1~4 |
| 顯微注射 | 1.注射品系：attP40或attP5果蠅品系(PhiC31內源表達) 2.注射樣品：donor質粒 3.注射胚胎數量：200-300個 |
2 |
| 雜交和篩選 | 1.P0果蠅與平衡子雜交 2.篩選F1陽性果蠅(紅眼) |
2 |
| 分子鑒定 | 1.插入目的序列鑒定 2.插入基因組位置鑒定 |
0 |
| 構建UAS和UAS+GAL4穩定遺傳品系 | 1.F1陽性果蠅雜交雙染色體平衡子 2.構建UAS穩定/純合品系 3.F2果蠅與Sp/CyO;Tubp-GAL4,Tubp-GAL80ts驅動品系雜交 4.構建2,3號染色體雙平衡的UAS;GAL4,GAL80ts穩定/純合品系【1】 |
8~10 |
| 合計 | 13~18 |
| attP-PhiC31定點插入(GAL4-RNAi基因敲低果蠅品系構建) | ||
| 實驗步驟 | 內容 | 周期(周) |
| 注射樣品制備 | 1.Donor載體構建：無縫克隆連接 載體：包含attB位點 + UAS + miniWhite marker 片段：21bp shRNA反向互補長片段【1】 2.Donor質粒去內毒素提取 |
1~4 |
| 顯微注射 | 1.注射品系：attP果蠅品系(PhiC31內源表達) 2號染色體：attP40、attP5 3號染色體：attP2、VK00005 2.注射樣品：donor質粒 3.注射胚胎數量：200-300個 |
2 |
| 雜交和篩選 | 1.P0果蠅與平衡子雜交 2.篩選F1陽性果蠅(紅眼) |
2 |
| 分子鑒定 | 1.插入目的序列鑒定 2.插入基因組位置鑒定 |
0 |
| 構建UAS和UAS+GAL4穩定遺傳品系 | 1.F1陽性果蠅雜交雙染色體平衡子 2.構建UAS穩定/純合品系 3.F2果蠅與GAL4驅動品系雜交【2】 4.構建2,3號染色體雙平衡的UAS+GAL4穩定/純合品系【3】 |
8~10 |
| 合計 | 13~18 |