均一化文庫測序
產品名稱: 均一化文庫測序
英文名稱: Equalized cDNA library sequencing
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均一化cDNA文庫是指某一特定組織或細胞的所有表達基因均包含其中,且在cDNA文庫中表達基因對應的cDNA的拷貝數相等或接近。構建均一化的cDNA文庫的主流方法是基于基因組DNA在拷貝數上具有相對均一化的性質,通過cDNA與基因組DNA飽和雜交而降低在文庫中高拷貝存在的cDNA的豐度;均一化處理后文庫的高豐度表達?cDNA?是處理前的0.3%~2.5%,基本滿足節約篩選的要求。
均一化cDNA文庫具有以下4方面的優點:第一,在經濟上具有廣泛的應用空間,可以節約大量試驗成本。第二,增加克隆低豐度mRNA的機會,適用于分析各種發育階段或各種組織的基因表達及突變檢測。第三,與原始豐度的mRNA拷貝數相對應的cDNA探針與均一化的cDNA文庫作雜交,可以估計出大多數基因的表達水平及發現一些組織特異的基因。而以往的文庫構建,忽略了mRNA豐度的影響。第四,可以用于遺傳圖譜的制作和進行大規模的原位雜交,作為優化的文庫系統還可以用于大規模的測序或芯片制作等研究。

生物信息服務

? ?樣品要求
1)樣品類型:細胞、新鮮組織或RNA樣品。
2)樣品量:細胞樣品請提供至少1×107個細胞,組織樣品請提供至少300mg的組織塊或切片,RNA樣品請提供10?μg以上的總RNA。
3)樣品質量:RNA無明顯降解,提取的總RNA?OD260/280值在1.8~2.2之間,濃度≥?500?ng/μl,28S:18S?≥?1.5,RIN?≥7。
