DNA克隆技術(shù)服務(wù)（亞克隆）
產(chǎn)品名稱： DNA克隆技術(shù)服務(wù)（亞克隆）
英文名稱： Cloning
產(chǎn)品編號(hào)： SHCLA001
產(chǎn)品價(jià)格： 詢價(jià)
產(chǎn)品產(chǎn)地： null
品牌商標(biāo)： null
更新時(shí)間： 2024-04-21T11:36:45
使用范圍： null
- 聯(lián)系人 : 王先生
- 地址 : 上海市閔行區(qū)光華路248號(hào)漕河涇光華園2號(hào)樓1101
- 郵編 : 201108
- 所在區(qū)域 : 上海
- 電話 : 150****6541 點(diǎn)擊查看
- 傳真 : 點(diǎn)擊查看
- 郵箱 : wangfeng@saihengbio.com
在進(jìn)行表達(dá)載體的構(gòu)建、目的蛋白質(zhì)的表達(dá)等實(shí)驗(yàn)時(shí)，通常需要獲得一段目的基因。我們可以根據(jù)您提供的已知參考序列 (NCBI上已發(fā)表)，以基因組DNA或總RNA為模板，獲取您所需要的某個(gè)區(qū)域的一段基因，并將之與克隆載體進(jìn)行體外連接，然后再轉(zhuǎn)化到宿主菌中進(jìn)行克隆、篩選，以此獲得質(zhì)粒重組體。
一、服務(wù)內(nèi)容
1. 基因釣取
8基因組DNA/總RNA的提取
8以基因組DNA為模板通過PCR擴(kuò)增得到目的基因
8以總RNA為模板通過RT-PCR擴(kuò)增得到目的基因
8目的基因PCR產(chǎn)物的純化及測(cè)序
8目的基因的克隆及測(cè)序
2. 基因克隆
8目的基因的轉(zhuǎn)載體：將含有目的基因的質(zhì)粒采用雙酶切的方法克隆至商品化的表達(dá)載體或改造后的特殊載體上。
8如果客戶提供PCR產(chǎn)物進(jìn)行亞克隆：我們建議先進(jìn)行TA克隆，再進(jìn)行亞克隆。
8目的基因的PCR克隆：將模板（通常為質(zhì)粒）上的一段序列通過PCR加酶切位點(diǎn)后克隆至商品化的表達(dá)載體或改造后的特殊載體上。
8對(duì)已有載體進(jìn)行改造。
二、實(shí)驗(yàn)步驟及周期
8從動(dòng)物組織或細(xì)胞中獲取gDNA或者cDNA；2～3個(gè)工作日。
8PCR擴(kuò)增相關(guān)基因或功能元件，連接至T載體測(cè)序；8～9個(gè)工作日。
8將測(cè)序后符合要求的基因或功能元件片段亞克隆至目的載體；10個(gè)工作日。
三、基本費(fèi)用
1. 基因釣取
擴(kuò)增的基因或功能元件大小在1.5k以內(nèi)，800元；
片段大小在1.5k～2.5k，1200元；
片段大小在2.5k～3.0k，1600元。
注: 1). 以上實(shí)驗(yàn)費(fèi)用及周期是針對(duì)正常實(shí)驗(yàn)樣品制定的，樣品特殊(包括樣品中基因豐度較低、核酸含量較少或者所需調(diào)取基因較長(zhǎng)的樣品等)或樣品多時(shí)除外。
2). 亞克隆費(fèi)用請(qǐng)參見亞克隆部分（如客戶只需要連接在T載體上的基因或功能元件片段，此費(fèi)用可免）。
2. 基因克隆
根據(jù)客戶要求將指定片斷按照相應(yīng)的方向和讀框裝入指定表達(dá)載體，如克隆位點(diǎn)無特殊要求，我們將自行選擇合適的酶切位點(diǎn)
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項(xiàng)目 |
服務(wù)要求 |
價(jià)格 |
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TA克隆 |
目標(biāo)片段長(zhǎng)度1.5kb以下 |
300元 |
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亞克隆
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無需引入新酶切位點(diǎn) |
雙酶切克隆 |
600元 |
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單酶切克隆 |
無需篩選插入方向 |
1000元 |
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需要篩選插入方向 |
1200元 |
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需引入新酶切位點(diǎn)或修改閱讀框 |
1500元 |
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將PCR產(chǎn)物克隆到特定載體 |
800元 |
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注：1、以上價(jià)格均不含測(cè)序的費(fèi)用，如需測(cè)序，費(fèi)用另計(jì)；
2、我們僅提供TA克隆載體（載體為pMD18-T），除此以外的載體需自己提供;
3、以上實(shí)驗(yàn)費(fèi)用是針對(duì)DNA片段長(zhǎng)度小于2 kb的情況制定的，若DNA片段長(zhǎng)度超過2 kb時(shí)，具體
價(jià)格請(qǐng)來電咨詢；
4、非常用限制性內(nèi)切酶由客戶自己提供，或我們幫忙訂貨，費(fèi)用客戶自理，剩余產(chǎn)品返回。
四、交貨內(nèi)容
8實(shí)驗(yàn)報(bào)告(包括實(shí)驗(yàn)操作步驟、圖片、引物序列等)、
8測(cè)序彩色波形圖、序列堿基圖
8保存電子版結(jié)果的CD光盤
8含有目的基因的重組質(zhì)粒及甘油菌、引物等
五、客戶須知
1. 基因釣取
8我們目前接收的樣品形式為與參考序列物種一致的材料或上述材料的基因組DNA/總RNA。
8實(shí)驗(yàn)材料必須保證新鮮，請(qǐng)您采樣后立即放入液氮中速凍或加入樣品穩(wěn)定劑
8基因組DNA/總RNA無明顯降解，總量大于5 μg。基因組DNA濃度大于10 ng/μl，總RNA濃度大于200 ng/μl。如果基因豐度較低或調(diào)取的基因較長(zhǎng)，請(qǐng)您提供盡量多的材料。
8由于材料的個(gè)體差異及PCR過程中會(huì)產(chǎn)生突變等原因，我們不保證獲取的基因與參考序列的堿基完全一致。
2. 基因克隆
8請(qǐng)?zhí)峁┠康?span lang="EN-US">DNA的來源及背景資料，TA克隆須提供PCR原液50ul以上或DNA模板及相應(yīng)的上下游引物;亞克隆須提供原始模板（質(zhì)粒圖譜、酶切位點(diǎn)、測(cè)序報(bào)告等）和目的載體及信息(質(zhì)粒圖譜)。
8如果所提供模板需本公司進(jìn)行PCR擴(kuò)增時(shí)，我們將采用高保真DNA聚合酶進(jìn)行PCR反應(yīng)，但不承諾測(cè)序結(jié)果與參考序列的堿基完全一致。
8我們僅保證克隆到載體的基因片段為您所提供的基因，所以請(qǐng)事先對(duì)目的基因進(jìn)行驗(yàn)證，確保模板的準(zhǔn)確性；如果您想對(duì)PCR產(chǎn)物進(jìn)行亞克隆，我們建議先進(jìn)行克隆測(cè)序。
8由于某些基因在克隆載體或表達(dá)載體中會(huì)有表達(dá)，而表達(dá)產(chǎn)物會(huì)抑制宿主菌生長(zhǎng)。因此，我們不保證所有的基因都能夠成功進(jìn)行克隆或者亞克隆。