腎缺血再灌注損傷(RIRI)大鼠模型
產品名稱: 腎缺血再灌注損傷(RIRI)大鼠模型
英文名稱: Rat Model for Renal Ischemia-Reperfusion Injury (RIRI)
產品編號: DSI529Ra01
產品價格: 1元
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來源:缺血再灌注,雙側腎動脈夾閉法
模式動物品系:SD大鼠,SPF級,雄性,體重 220g~250g
實驗分組:隨機分組:對照組,模型組,陽性藥物組,受試藥物組,15只每組
實驗周期:24h or 72h
建模方法:
1. 選取250g左右大鼠,術前禁食12h,自由飲水。
2. 15%水合氯醛(350mg/kg)腹腔注射麻醉,大鼠背部去毛,消毒備皮。
3. 在背部脊椎旁1cm、肋骨下緣1cm處剪開皮膚及肌肉,可見到腎臟, 小心分離出兩側腎臟的腎動脈,迅速用動脈夾夾閉兩側腎動脈。
4. 缺血60min后松開動脈夾,恢復血流,觀察腎臟恢復情況。
5. 分兩層縫合開口,待大鼠清醒后,將其放回潔凈籠具后放回飼養室飼養,定期觀察大鼠狀態及死亡情況并做好記錄。
6. 對照組不做缺血處理,其他操作相同。
7. 分別取再灌注0h、3h、6h、12h、24h、72h六個時間點取材。麻醉大鼠,下腔靜脈取血,室溫靜置2h后于4℃3000r離心10分鐘提取血清,放入-80冰箱凍存。同時取左腎組織留作病理標本,右腎組織分生標本。
應用:疾病模型
模型評價
1. 血清生化指標檢測:
取各時間點(0h、1h、3h、6h、12h、24h、72h)血清,檢測血清BUN(尿素氮)和Scr(血肌酐)水平,評估腎功能。
2. 腎系數檢測
摘取雙側腎臟后,生理鹽水沖洗,稱重計算腎系數。
腎系數=雙側腎重(mg)/體重(g)
3. 腎小管壞死的評分
每張切片×200 倍鏡下取外髓質部 10 個視野,按 0 = 正常,1 = 輕微損傷(受損腎小管< 5%) ,2= 輕度損傷(受損腎小管 5 %~25 %) ,3 = 中度損傷(受損腎小管 25 %~75 %) ,4 = 重度損傷(受損腎小管> 75 %) 作半定量分析并計算其均值,作為腎小管壞死的評分指數
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組織病理學
4%多聚甲醛溶液固定48h。常規組織脫水、透明、浸蠟 、包埋。石蠟切片進行HE染色和PAS染色。
對照組大鼠腎小球、 腎小管及腎間質結構基本正常。在模型組,隨著再灌注時間的延長呈現不同程度的腎臟病理改變,可見腎小管上皮細胞渾濁腫脹,出現水樣或空泡變性,刷狀緣消失,部分腎小管上皮細胞凝固性壞死、脫落,腔內可見管型,并可見間質水腫,間質內灶性炎癥細胞浸潤,腎小球病變不明顯。
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標志因子水平
ELISA 法檢測血清 TNF-α、IL-6 含量, 模型組大鼠血清 TNF- α 和 IL-6 含量在各時間點均顯著高于對照組,其中24h為最顯著
