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通過使用工具病毒載體介導將外源基因導入肺部細胞中，對疾病特定基因進行定向和組織特異性的改造，將為肺疾病研究與治療提供強大工具。
工具病毒選擇指南
首先，如何選擇合適的病毒載體：
慢病毒、腺病毒和腺相關病毒（AAV）等都是常用的工具病毒載體，在肺部研究中該如何選擇呢？
1.? 慢病毒：慢病毒具有毒性低、損傷小的特點，且病毒感染細胞后，可以整合入基因組長期表達，是細胞實驗的首選。應用于肺部在體注射時，引起的免疫反應較為溫和。
2.? 腺病毒：腺病毒滴度高，載體容量大。但應用于在體注射時易引起較強烈的免疫反應，嚴重時可導致實驗動物死亡。
3.? 腺相關病毒AAV：AAV 體積小，滴度高，擴散性好，是在體實驗的首選。AAV有多種血清型，不同的血清型對不同的臟器有較高的識別及感染能力。AAV5、AAV６和AAV９等對于肺有較高的趨向性。目前，AAV已經應用于肺囊性纖維化的臨床實驗中。
了解了這些病毒載體在肺部研究中的優勢和不足后，如何根據實驗目的來挑選合適的基因操作工具呢？建議您可以從以下這幾個方面出發：
1.? 工具載體的表達時間與實驗觀察時間是否相符；
2.? 工具載體可以容納的片段大小與目的基因大小是否契合；
3.? 工具載體對目的細胞、在體組織的轉導是否足夠高效。
吉凱小建議：
1.? 在基因大小允許的前提下，在體實驗建議優先選擇腺相關病毒（AAV）。AAV具有滴度高，擴散效果好，免疫原性低等特點。AAV5/6/9血清型對肺有較好的趨向性，其中AAV9在肺部的表達最強，且產生的免疫反應較小。點擊了解更多AAV血清型選擇小竅門>>
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2.? 細胞體外感染建議選擇慢病毒：慢病毒在感染細胞后2-4 天開始表達，且對細胞毒性低、損傷小。
3.? 如需目的基因在肺部中特異性表達，可使用組織特異性啟動子，如肺上皮細胞特異性啟動子SP-C。吉凱提供組織特異性啟動子載體的病毒包裝服務，點擊了解>>
注射方法
病毒工具在肺部的注射方法
肺部病毒感染常用的方法有系統注射（尾靜脈注射或腹腔注射）、及鼻內或氣管內遞送（經呼吸道）等。下面，以鼻內滴注為例做詳細說明。
1. 使動物處于足夠深的麻醉狀態，以防止小鼠運動或對載體的反應而打噴嚏或咳嗽，但也需要防止小鼠麻醉過度而死亡。
2. 將小鼠以背臥姿勢固定，并慢慢地將AAV 懸液通過小鼠鼻孔內壁逐滴滴入，為保證最大的肺部感染效率，最小體積為50μL（每個鼻孔25μL），最大體積為75μL（每個鼻孔37.5μL）。待小鼠呼吸恢復正常后，再滴入一次75μL 的AAV 懸液。
3. 將小鼠輕輕從工作臺拿下，并將頭部和胸部用折疊的紙巾小幅度墊高，以保證小鼠順暢的呼吸。待小鼠蘇醒后，放回鼠籠。
備注：鼻內滴注法是一種直接的AAV 感染法，操作簡單且對設備要求低。但AAV 顆粒容易沉積在上呼吸道（鼻道、鼻竇和咽）和胃腸道，如需要有效地感染到下呼吸道，則需要加大AAV劑量。
用量參考
肺部注射病毒用量參考
以下表格中為吉凱客戶應用文獻總結（部分）。更多肺部病毒注射參數，點擊查看與下載>>
1.?慢病毒
代表文獻（38）Cell death & disease,2017,8(1):e2566
2. 腺病毒
代表文獻（39）Europenan Respiratory Journal,2010,36(4):907-914
3. 腺相關病毒AAV
代表文獻（40）Human Gene Therapy,2007,18(4):344-354
