斑馬魚基因敲除品系制備/構(gòu)建基因敲除斑馬魚
產(chǎn)品名稱： 斑馬魚基因敲除品系制備/構(gòu)建基因敲除斑馬魚
英文名稱： zebrafish
產(chǎn)品編號：
產(chǎn)品價格： 0
產(chǎn)品產(chǎn)地： null
品牌商標(biāo)： null
更新時間： 2024-06-04T15:23:07
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服務(wù)簡介
1.基因敲除(Gene Knockout)
根據(jù)給定GeneID或Gene?name，分析基因保守結(jié)構(gòu)域，在保守結(jié)構(gòu)域或客戶指定區(qū)域設(shè)計靶點并制備靶點gRNA，gRNA共注射使基因產(chǎn)生移碼突變，通過PCR篩選得到穩(wěn)定遺傳品系。
2. 基因敲除技術(shù)特點
??? 2.1 通過將基因敲除斑馬魚品系與野生型相比較，研究者可以揭示特定基因的功能。
??? 2.2 在基因組水平上將目標(biāo)基因敲除，遺傳背景干凈清晰，是研究基因功能的金標(biāo)準(zhǔn)。
服務(wù)流程
▲根據(jù)客戶提供的GeneID或Gene?name進行基因分析→▲mRNA和多個gRNA靶點的設(shè)計及合成→▲高效gRNA靶點的篩選及效率驗證→▲F0代斑馬魚的可遺傳性篩選→▲雜合子F1代斑馬魚的基因型鑒定。
斑馬魚敲除品系成功案例
1、基因分析
分析目的基因的保守結(jié)構(gòu)域；
2、靶點篩選
設(shè)計4個gRNA靶點，PCR檢測包含靶點的區(qū)域真實序列，顯微注射驗證靶點效率；
3、大規(guī)模注射養(yǎng)殖F0
gRNA 注射，共養(yǎng)殖 F0 約 80 條用于后期Founder篩選；
4、Founder 篩選?
F0代斑馬魚與野生型外交，收集48hpf的F1胚胎抽取基因組，PCR鑒定，測序結(jié)果在靶點位置出現(xiàn)雙峰的認(rèn)為產(chǎn)生突變，然后TA clone驗證其可能產(chǎn)生的突變方式；
5、F1 代篩選
F1代斑馬魚剪尾篩選，TA clone驗證突變方式：
通過對測序圖譜的分析獲得突變方式為：-5bp，產(chǎn)生移碼突變的敲除斑馬魚；
通過對測序圖譜的分析獲得突變方式為：-4-3bp，產(chǎn)生移碼突變的敲除斑馬魚模型。
環(huán)特生物優(yōu)勢
成熟的基因敲除技術(shù)快速獲得穩(wěn)定品系；多靶點共注射F0代驗證基因功能。
環(huán)特生物（歆佳醫(yī)藥技術(shù)團隊）依托國際領(lǐng)先的斑馬魚基因編輯技術(shù)，專注于為客戶提供定制化的斑馬魚基因編輯品系構(gòu)建服務(wù)。目前已成功制備超過350個基因編輯品系，測試超過500個gRNA靶點。已為150多家單位提供斑馬魚基因敲入、敲除、沉默、點突變、轉(zhuǎn)基因服務(wù)及斑馬魚疾病模型開發(fā)等專業(yè)的基因編輯技術(shù)服務(wù)。
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斑馬魚基因編輯服務(wù)，詳細方案及報價，請撥電話咨詢0571-83782130，或者直撥項目經(jīng)理手機17364531293（微信同號）咨詢。