慢病毒載體
產品名稱: 慢病毒載體
英文名稱: lentiviral vector
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更新時間: 2024-10-31T11:50:38
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?慢病毒載體構建,包裝,純化
| Lentivirus是逆轉錄病毒的一種,具有逆轉錄病毒的基本結構和特性;能整合入宿主細胞基因組,長期表達,可用于轉基因動物制備;但也有不同于逆轉錄病毒的組分和特性;比逆轉錄病毒具有更高的滴度,不僅可以感染分裂細胞,更重要的是還能感染非分裂的細胞。 利用Lentivirus構建的shRNA表達載體,與化學合成的siRNA和基于瞬時表達載體構建的shRNA相比,一方面可以替代后者,另一方面,Lentivirus-shRNA載體經包裝系統包裝后,可用于感染依靠傳統轉染試劑難于轉染的細胞(如原代細胞、懸浮細胞等),并且在感染后可以整合到受感細胞的基因組,進行長時間的穩定表達,是制備穩定表達shRNA細胞株和進行體內實驗(in vivo)的最有效手段。 目前我們能夠為客戶提供從載體構建到慢病毒包裝純化和檢測的一站式服務;同時公司還在高效慢病毒生產技術的基礎上建立并完善了慢病毒載體制備轉基因動物的實驗技術。 ? 慢病毒載體構建包裝實驗流程如下:? 1根據目的基因相關信息(序列,基因序列號等)獲取目的基因; 2. 選擇符合實驗要求的載體; 3. 將目的基因構建到慢病毒載體獲得含有目的基因的重組載體; 4. 對于測序正確的重組質粒,提取和純化高質量(不含內毒素)的重組質粒; 5. 使用高效重組載體和慢病毒包裝質粒共轉染293T?細胞,進行病毒包裝并收集上清液; 6. 通過超濾和超速離心濃縮和純化病毒; 7. 使用病毒液感染293T細胞,測定病毒滴度。 ? 實驗項目和實驗周期:? ?
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