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RNA干擾（RNA interfering，RNAi）現象是由與靶基因序列同源的雙鏈RNA引發的廣泛存在于生物體內的序列特異性基因轉錄后的沉默過程。由于RNAi具有高度的序列專一性和有效的干擾，可以特異地將特定的基因沉默，從而獲得基因功能喪失或基因表達量的降低，因此可以作為功能基因組學的一種強有力的研究工具。RNAi技術可廣泛應用到包括功能學，藥物靶點篩選，細胞信號傳導通路分析，疾病治療等等。我們可對靶基因序列進行干擾位置效應評價和序列同源型分析，完成siRNA/shRNA/miRNA等多種序列的設計，并提供從siRNA合成、RNAi載體構建到RNAi相關的病毒包裝、RNAi功能驗證等全面的RNAi解決方案。 ※ RNAi服務類別 1、siRNA 對于瞬時基因沉默實驗，化學合成siRNA的方法操作簡便，容易獲得高水平的瞬時沉默效果，特異性強。我們通過嚴格設計來增強siRNA的專一性；針對某靶基因設計的3條siRNA可保證其中兩條的Knockdown效率達到70%（在轉染效率大于80%的情況下）。 1.1 普通siRNA：均由HPLC純化，100％除去尚未配對的單鏈 1.2 化學修飾siRNA：利用2’-Fluoro或2’－OMe修飾以提高siRNA在血清和培養基中的穩定性；作用時間長于普通siRNA 1.3 熒光標記siRNA 2、RNAi載體 RNAi載體表達可以長時間穩定地研究基因功能，載體在細胞中持續抑制靶基因的表達可達數星期甚至更久。 miR-RNAi載體構建－利用細胞內源性的miRNA加工機制，相比傳統shRNA載體可更高效地表達RNA發夾結構，并具有采用EmGFP進行表達追蹤和順式表達多個miRNA的優點。針對人類、大鼠、小鼠的大多數基因預先設計好了miR RNAi序列，每個基因設計的4條 miR RNAi Select序列我們保證至少有2條可以達到至少70%轉錄水平的knockdown（在轉染效率>80%的前提下）。 2.2 shRNA載體構建—設計針對特定基因的shRNA序列，并將其連入組成型pENTR?/U6或誘導型pENTR?/H1/TO載體中。 3、RNAi導入優化 由于siRNAs是進入細胞后才能對蛋白的表達進行抑制，因此如何高效地將siRNAs轉入細胞也是成功抑制基因表達的關鍵步驟。例如，一個siRNA分子對某特定基因的抑制效率為90%，而轉染效率為10%，那么最后抑制蛋白表達最后的效率只有9%，可見如何提高siRNAs的導入效率非常重要。 3.1 RNAi轉染優化－為了使得RNAi實驗獲得最大化的干擾效果，利用脂質體轉染試劑技術，針對多種真核生物細胞進行轉染參數的優化。RNAi 熒光標記的陰性對照、陽性對照可以用于進行轉染效率的優化。 3.2 病毒侵染優化－針對難于轉染細胞（特別是神經細胞、懸浮細胞、干細胞）和In vivo實驗，基于的RNAi病毒載體構建、包裝、濃縮等技術，利用腺病毒或慢病毒進行RNAi研究 3.3 篩選RNAi穩定細胞株－利用抗生素來篩選穩定表達shRNA或miRNA的細胞株 4、RNAi干擾效果檢測 用實時定量PCR方法檢測mRNA水平的基因敲減效果；通過Wester blot方法檢測蛋白水平的基因敲減效果