人apelin 12(AP12)ELISA Ki技術(shù)參數(shù)
人apelin 12（AP12）ELISA Ki
本試劑盒用于測(cè)定人血清、血漿及相關(guān)液體樣本中apelin 12（AP12）含量。
人apelin 12（AP12）ELISA Kit
種屬人ELISA試劑盒
其他相關(guān)ELISA試劑盒（大鼠、小鼠、豬、雞、鴨、兔、羊...ELISA試劑盒）；
產(chǎn)品規(guī)格：48T/96T；
試劑盒保存：2-8℃；
試劑盒有效期：6個(gè)月；
本試劑不同批號(hào)組分不得混用；ELISA試劑盒說(shuō)明書(shū)如中文說(shuō)明書(shū)與英文說(shuō)明書(shū)有異，以英文說(shuō)明書(shū)為準(zhǔn)；
試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標(biāo)包被板開(kāi)封后如未用完，板條應(yīng)裝入密封袋中保存。
試劑盒性能：1.樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990以上，2.批內(nèi)與批見(jiàn)應(yīng)分別小于9%和11%。
人apelin 12(AP12)ELISA Ki技術(shù)參數(shù) ELISA試劑盒檢測(cè)方法
用于檢測(cè)未知抗原的雙抗體夾心法:
1. 包被：用0.05M PH9.牰碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質(zhì)含量為1～10μg／ml。在每個(gè)聚苯乙烯板的反應(yīng)孔中加0.1ml，4℃過(guò)夜。次日，棄去孔內(nèi)溶液，用洗滌緩沖液洗3次，每次3分鐘。（簡(jiǎn)稱洗滌，下同）。
2. 加樣：加一定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中，置37℃孵育1小時(shí)。然后洗滌。（同時(shí)做空白孔，陰性對(duì)照孔及陽(yáng)性對(duì)照孔）。
3. 加酶標(biāo)抗體：于各反應(yīng)孔中，加入新鮮稀釋的酶標(biāo)抗體（經(jīng)滴定后的稀釋度）0.1ml。37℃孵育0.5～1小時(shí)，洗滌。
4. 加底物液顯色：于各反應(yīng)孔中加入臨時(shí)配制的TMB底物溶液0.1ml，37℃10～30分鐘。
5. 終止反應(yīng)：于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml。
6. 結(jié)果判定：可于白色背景上，直接用肉眼觀察結(jié)果：反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深，陽(yáng)性程度越強(qiáng)，陰性反應(yīng)為無(wú)色或極淺，依據(jù)所呈顏色的深淺，以“+”、“-”號(hào)表示。也可測(cè)O·D值：在ELISA檢測(cè)儀上，于450nm（若以ABTS顯色，則410nm）處，以空白對(duì)照孔調(diào)零后測(cè)各孔O·D值，若大于規(guī)定的陰性對(duì)照OD值的2.1倍，即為陽(yáng)性。